Serpin A4/Kallistatin ELISA试剂盒
我公司所销售的 ELISA 试剂盒。品种多,质量好,灵敏度高,
涉及的品牌有美国 R&D RB UCL 原装 / 分装等不同价格档次的盒子。
ELISA 技术的 - 操作要点
优质的试剂 , 良好的仪器和正确的操作是保证 ELISA 检测结果准确可靠的必要条件。 ELISA 的操作因固相载体的形成不同而有所差异 , 国内医学检验一般均用板式点 . 本文将叙述板式注意要点 , 要详细的使用说明 , 严格遵照规定操作 , 必能得出准确的结果 .
1 标本的采取和保存
可用作 ELISA 测定的标本十分广泛 , 体液 ( 如血清 ), 分泌物 ( 唾液 ) 和排泄物 ( 如尿液 , 粪便 ) 等。均可作标本以测定其中某种抗体或抗原 成份 . 有些标本可直接进行测定 ( 如血清 , 尿液 ), 有些则需经预处理 ( 如粪便和某些分泌物 ). 大部分 ELISA 检测均以血清为标本 . 血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外 , 其他成份均同等于血清 . 制备血浆标本需借助于抗凝剂 , 而血清标本只要待血清自然凝固 , 血块收缩后即可取得 . 除特殊情况外 , 在医学检验中均以血清作为检测标本 . 在 ELISA 中血浆和血清可同等应用 . 血清标本可按常规方法采集 , 应注意避免溶血 , 红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质 , 以 HRP 为标记的 ELISA 测定中 , 溶血标本可能会增加非特异性显色 . 血清标本宜在新鲜时检测 . 如有细菌污染 , 菌体中可能含有内源性 HRP, 也会产生假阳性反应 . 如在冰箱中保存过久 , 其中的可发生聚合 , 在间接法 ELISA 中可使本底加深 . 一般说来 , 在 5 天内测定的血清标本可放置于 4 ℃ , 超过一周测定的需低温冰存 . 冻结血清融解后 , 蛋白质局部浓缩 , 分布不均 , 应充分混匀宜轻缓 , 避免气泡 , 可上下颠倒混和 , 不要在混匀器上强烈振荡 . 混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤 , 澄清后再检测 . 反复冻融会使抗体效价跌落 , 所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测 , 宜少量分装冰存 . 保存血清自采集时就应注意无菌操作 , 也可加入适当防腐剂 .
2 试剂的准备
按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂 . ELISA 中用的蒸馏水或去离子水 , 包括用于洗涤的 , 应为新鲜的和高质量的 . 自配的缓冲液应用 pH 计测量较正 . 从冰箱中取出的试 验用试剂应待温度与室温平衡后使用 . 试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存 .
3 加样
在 ELISA 中一般有 3 次加样步聚 , 即加标本 , 加酶结合物 , 加底物 . 加样时应将所加物加在 LEISA 板孔的底部 , 避免加在孔壁上部 , 并注意不可溅出 , 不可产生气泡 .
备注:只限参考,具体操作需按说明书。请。