乳酸脱氢酶（ LDH ）活性微量法测定的原理 是通过检测 LDH 催化丙酮酸还原为乳酸的过程中 NADH 的生成量来间接测定 LDH 的活性。
具体过程如下：
反应原理： 在 LDH 的作用下， NAD+ 被还原生成 NADH 。 NADH 与 WST-8 相互作用产生颜色，从而进行比色测定（λ max=450 nm ）。
反应条件： LDH 将 NAD 还原为 NADH ， NADH 与 WST-8 相互作用产生颜色。这个反应在冰上避光进行，各组分（如 Assay Buffer 、 Lactate 、 NAD 、 WST-8 、 Enhancer ）需在实验前从冰箱中取出并平衡至室温，整个过程需避光操作。
吸光度测量： 在 450 nm 波长下测量吸光度，吸光度与 LDH 活性成正比，可以通过比色法测定 LDH 的活性。
实验步骤和所需设备：
实验步骤： 准备工作液（ 1 × Assay Buffer 、 NAD 、 WST-8 、 Enhancer 和 Lactate 混合均匀），将工作液加入 96 孔板或微量玻璃比色皿中，加入待测样品， 37 ℃恒温孵育一定时间后测量吸光度。
所需设备： 酶标仪或可见分光光度计（能测 450 nm 处的吸光度）、恒温箱、制冰机、低温离心机、 96 孔板或微量玻璃比色皿、可调节式移液枪及枪头、去离子水、匀浆器（如果是组织样本）。
实验注意事项 ：
试剂保存： 各组分（如 Assay Buffer 、 Lactate 、 NAD 、 WST-8 、 Enhancer ）需在冰上避光保存，避免反复冻融。
操作注意事项： 整个实验过程需在冰上避光进行，避免光照影响结果 。
