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巴氏染液（试剂盒）配制:苏木精、桔黄克、EA染液
2013-8-23 阅读(2064)
巴氏染液（试剂盒）配制
1、苏木精：
Harris苏木精：苏木精5克溶于无水乙醇50毫升 ，硫酸铝钾100克溶于蒸馏水1000毫升 ，混合后煮沸，待稍冷加入氧花汞2.5克，再煮沸2分钟，用前加冰醋酸20毫升
改良克ill氏半氧化苏木精：
苏木精2克, 无水乙醇250毫升, 硫酸铝17.6克,（可减半量） 碘酸钠0.2克, 柠檬酸2克，, 蒸馏水750毫升。
配制方法：将苏木精溶于无水乙醇，硫酸铝溶于蒸馏水，*溶解后两液混合，依次加入碘酸钠，柠檬酸，。
此配方特点： 配制时勿须加温。配后即可应用。性能稳定，基本消除了过度氧化的苏木精结晶污染涂片的麻烦。唯染色时间较长，须5～10分钟。
2、桔黄克6： 桔黄克 0.5克，溶于95百分比酒精100毫升, 加磷钨15m克。
3、 EA染液：
EA36：由3种贮备液按比例混合而成：
0.5百分比亮绿酒精溶液45毫升，
0.5百分比裨士麦褐酒精溶液10毫升，
0.5百分比伊红Y酒精溶液45毫升，
混合后，再加磷钨酸0.2克，饱和碳酸锂水溶液1滴。
EA50：3百分比亮绿水溶液10毫升，纯甲醇250毫升， 20百分比伊红Y 水溶液20毫升，冰醋酸20毫升，磷钨酸2克 （水溶后加入），95百分比酒精700毫升 。
染色方法
1、经固定的涂片入水、苏木精染核、盐酸酒精分化、返兰同HE染色 。
2、70百分比、80百分比、95百分比酒精逐级脱水各1分钟。
3、桔黄克6 3～5 分钟 。
4、95百分比酒精二缸漂洗各1 分钟 。
5、EA36或EA50 5 分钟 。
6、95百分比酒精二缸漂洗各1 分钟 。
7、*二缸漂洗各1 分钟 。
8、二甲苯二缸透明各1 分钟 。
9、中性树胶封片。
染色结果
核深蓝色, 鳞状上皮底层、中层及表层角化前细胞浆染绿色，表层不全角化细胞胞浆染粉红色, *角化细胞胞浆呈桔黄色, 红细胞染鲜红色，粘液染淡蓝色或粉红色。
巴氏染色特点
细胞透明度好, 结构清晰, 涂片色彩丰富而鲜艳, 因能显示鳞状上皮不同角化程度, 常用于阴道涂片测定雌激素水平。宫颈涂片和痰涂片内分化差的小角化细胞癌显示桔黄色胞浆, 在红色坏死背景中特别突出, 不易漏诊。因此本室宫颈涂片、痰涂片常规用巴氏染色。但巴氏染液多数用95百分比酒精配制，成本高, 染液配制麻烦, 染色步骤多, 而且染液易陈旧, 染色效果不稳定, 因此基层医疗单位推广有困难。EA50染液配方稍复杂, 但不易沉淀，染色效果较EA36稳定。
