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上海哈灵生物科技有限公司
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PCR 纯化试剂盒/DNA 纯化试剂盒
2014-12-11 阅读(1118)
PCR 纯化试剂盒/DNA 纯化试剂盒
产品简介：
PCR纯化试剂盒(PCR Clean Up Kit)，也称DNA纯化试剂盒(DNA Purification Kit)是一种用于PCR产物纯化或从多种DNA
反应体系中纯化DNA的试剂盒。
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适用于PCR反应后去除引物，酶，矿物油，甘油，盐等杂质；也同样适用于酶切，连接，磷酸化，补平或切平，随机引物等反应后的DNA纯化。所得DNA可直接用于酶切，连接，转化细菌，测序，PCR，杂交等后续操作。
本试剂盒适用于纯化100bp-10kb DNA，长至30个碱基的引物均可被*去除。?
本试剂盒采用了一种新型的离子交换柱。在特定条件下，使DNA能在离心过柱的瞬间，结合到DNA纯化柱上，在一定条件下又能将DNA充分洗脱，从而实现DNA的快速纯化。无需酚氯仿抽提，无需酒精沉淀，12个样品只需不足15分钟即可完成。
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每个DNA纯化柱可以结合的DNA量的上限约为15微克。
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DNA回收效率约为90%。接近100bp或10kb的DNA片断回收效率要略低一些，大于10kb的DNA回收效率迅速下降。另外如果样品中DNA含量特别低也会导致回收效率下降。?
每个试剂盒足够纯化50个平均体积不超过400微升的DNA样品。
保存条件：
室温保存，一年有效。
注意事项：?
*次使用前在溶液II
(洗涤液)中加入39ml无水乙醇，混匀，并在瓶上做好标记。
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溶液I对人体有刺激性，操作时请小心，并注意适当防护。
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本试剂盒所有操作均在室温进行，操作时无需冰浴。所有离心也均在室温进行。
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废液收集管在一次抽提中需多次使用，切勿中途丢弃。
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为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：
1.加入等体积的溶液I，混匀。
例如如DNA样品体积为100微升，则加100微升溶液I。如果等体积混合后体积较大，可以把部分样品加入到纯化柱内，经
离心处理后，再加入剩余的样品继续处理。矿物油对于本试剂盒没有干扰。
2.加入到DNA纯化柱内，
室温放置1分钟。
3.zui高速(16000g，约12000-14000rmp左右)离心1分钟，倒弃收集管内的液体。
注意：这一步一定要达到16000g，较低离心速度会导致回收效率下降。
4.在DNA纯化柱内加入700微升溶液II，室温放置1分钟。
5.zui高速离心1分钟，洗去杂质。倒弃收集管内的液体。
6.再加入500微升溶液II，zui高速离心1分钟，进一步洗去杂质。倒弃收集管内的液体。
7.zui高速再离心1分钟，除去残留液体并让残留的乙醇充分挥发。
8.将DNA纯化柱置于1.5毫升离心管上，加入30微升溶液III至管内柱面上，放置1分钟。
用1.5ml离心管作为收集管。溶液III需要直接加至管内柱面中央，使液体被纯化柱吸收。如果不慎将溶液III沾在管壁上，
一定要震动管子，使液体滑落到管底，以便被纯化柱吸收。也可以用重蒸水或MiliQ级纯水替代溶液III，但是水的
pH应不小于6.5。如需得到较高浓度的DNA，可以只加20微升溶液III，但产量会略有下降。放置较长时间例如3-5分钟，会对提供产量略有帮助。
9. zui高速离心1分钟，所得液体即为高纯度DNA
