目前临床上使用血清标本测定的标志物一般有传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标志物、激素、特种蛋白、细胞因子和治疗药物等。用于传染性病原体的抗原和抗体、肿瘤标志物和特种蛋白等的检测的血清标本的收集则没有时间和体位方面的影响，用于ELISA试剂盒测定的临床标本zui为常用的是血清（浆），有时由于特定的检测目的，也用到唾液、脑脊液、尿液、粪便等标本。对用于激素和治疗药物测定的血清标本的收集，要留意收集时间甚或体位有可能会对测定结果产生影响。再如治疗药物的检测，应根据药代动力学选择服药后的zui适时间抽血检测。又如当从卧位变为站立位时，血清中肾素活性将泛起显著增高。如可的松在早晨4～6点之间，会有一峰值泛起：生长激素、促黄体激素（LH）和促卵泡激素（FSH）均以阵发性方式开释，因此，在测定此类激素时，有必要在紧密亲密相连的时间距离内采取数份血样本，以其中间值为测定值。只是在处理和保存方面要考虑以下几个方面：
一般说来，在5天内测定的血清标本可放置于4℃，超过一周测定的需低温冰存。冻结血清
    融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均，应充分混匀宜轻缓，避免气泡，可上下颠倒混和，不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤，澄清后再检测。反复冻融会使抗体 效价跌落，所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测，宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作，也可加入适当防腐剂（见3.2.4）。
    按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。ELISA中用的蒸馏 水或去离子水，包括用于洗涤的，应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液应用pH计测量较正。从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用。试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。
    在ELISA中一般有3次加样步聚，即加标本，加酶结合物，加底物。加样时应将所加物加在LEISA板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可溅出，不可产生气泡。
    加标本一般用微量加样器，按规定的量加入板孔中。ELISA试剂盒每次加标本应更换吸嘴，以发生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加样。有此测定（如间接法ELISA）需用稀的血清，可在试管 中按规定的稀释度稀释后再加样。也可在板孔中加入稀释液，再在其加入血清标本，然后在微型震荡器上震荡1分钟以保证混和。加酶结合物应用液和底物用液时可用定量多道加液器，使加液过程迅速完成。