跟着冬天的降临,*近两周的温度显现忽高忽低,在这温度不定的时节里,elisa试剂盒要怎么做到保温呢?丰寿科技(上海)有好办法。
一、什么是ELISA保温
在ELISA试剂盒中一般有两次抗原抗体反应,即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的结束需求有必定的温度和时间,这一保温过程称为温育,有人称之为孵育,在ELISA试剂盒中似不恰当。
二、为什么ELISA反应需求保温?
ELISA属固相免疫测定,抗原、抗体的结合只在固相表面上发作。以抗体包被的夹心法为例,参与板孔中的标本,其间的抗原并不是都有相等的和固相抗结合的机会,只有*贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体触摸。这是一个逐渐平衡的过程,因此需经分散才干抵达反应的结尾。在其后参与的酶标记抗体与固相抗原的结合也相同如此。这就是为什么ELISA反应总是需求必定时间的温育。
三、多少温度才适宜?
温育常选用的温度有43℃、37℃、室温文4℃等。37℃是实验室中常用的保温温度,也是大多数抗原抗体结合的适宜温度。在建立ELISA办法作反应动力学研究时,实验标明,两次抗原抗体反应一般在37℃经1~2小时,产物的生成可达。为加快反应,可前进反应的温度,有些实验在43℃进行,但不宜选用更高的温度。抗原抗体反应4℃更为*,在放射免疫测定中多使反应在冰箱中过夜,以构成*多的沉积。但因所需时间太长,在ELISA试剂盒中一般不予选用。
四、保温办法
除有的ELISA仪器附有特制的电热块外,一般均选用水浴,可将ELISA试剂盒板置于水浴箱中,ELISA板底应贴着水面,使温度灵敏平衡。为避免蒸发,板上应加盖,也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔,此刻可让反应板漂浮在水面上。若用保温箱,ELISA试剂盒应放在湿盒内,湿盒要选用传热性良好的资料如金属等,在盒底垫湿的纱布,*后将ELISA板放在湿纱布上。湿盒应先放在保温箱中预温至规矩的温度,特别是在气温较低的时分更应如此。无论是水浴仍是湿盒温育,反应板均不宜叠放,以保证各板的温度都能灵敏平衡。室温温育的反应,操作时的室温应严厉束缚在规矩的范围内,规范室温温度是指20~25℃,但具体操作时可根据说明书的要求操控温育。
室温温育时,ELISA试剂盒只需平置于操作台上即可。应注意温育的温度和时间应按规矩力求。为保证这一点,一个人操作时,一次不宜多于两块板一起测定。
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