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ELISA试剂盒生产流程及注意事项

时间:2020-6-29阅读:1857
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1.ELISA试剂盒生产流程

2.包被

2.1 将包被抗原用包被缓冲液制作包被液,每孔取100 mL参加酶标板,盖好盖板膜,包被条件如下表,4℃ 16-20h包被时酶标板可以叠放,而37℃ 2h包被时酶标板之间的距离应保持一同(一般为5cm)。依据培养箱的规划调度酶标板间的距离,如培养箱从底部产热,则应增加底层酶标板间的距离为10cm 。

2.2  包被加样采用吸二打一的方法,应避免加在孔壁上部,若不慎滴加在孔壁上,依据该滴溶液是否应参加孔内再做判别,若应参加,则留心振动使其落入孔底,反之则用吸水纸留心吸出,并留意不行溅起,不行发生气泡。

2.3  包被前预吸检查枪头是否合格,水流是否一同,不一同者应geng换枪头,包被应选用枪头,每包被一块板,应将枪头套紧,并且在包被的过程中要留意检查吸液是否一同,在包被过程中若出现任何小问题,都应将此块板做出记号,以便后期组装入库时筛选。

2.4 若选用37℃ 2h包被形式,则应给酶标板编码,确保每块板子的包被时刻一同。

3.洗板

3.1 包被后要进行两次洗刷,250微升/孔,洗刷完毕后,应在毛巾上拍干参加液体,并及时进行下一步关闭。

3.2 洗刷时要留意检查水流是否一同,在洗刷程中若出现任何小问题,都应将此块板做出记号,以便后期组装入库时筛选。

4.关闭

4.1 关闭液应提早一小时取出开始回温,用前摇匀,每孔取180 mL参加酶标板,盖好盖板膜,37℃关闭 1.5h, 酶标板之间的距离应保持一同(一般为5cm)。依据培养箱的规划调度酶标板间的距离,如培养箱从底部产热,则应增加底层酶标板间的距离为10cm 。

4.2  关闭加样采用吸一打一的方法,应避免加在孔壁上部,若不慎滴加在孔壁上,依据该滴溶液是否应参加孔内再做判别,若应参加,则留心振动使其落入孔底,反之则用吸水纸留心吸出,残留在枪头内的溶液不要打出 避免发生气泡。并留意不行溅起,不行发生气泡

4.3 关闭前预吸检查枪头是否合格,水流是否一同,不一同者应geng换枪头,关闭应选用枪头,每关闭一块板,应将枪头套紧,并且在包被的过程中要留意检查吸液是否一同,在关闭过程中若出现任何小问题,都应将此块板做出记号,以便后期组装入库时筛选。

5.烘干装袋

5.1 关闭完后,跌倒孔内液体,并在毛巾上拍干,接下来采用烘干或许晒干的方法*单调酶标板。烘干:37 ℃倒置(不加盖板膜或用自封袋),每5块板烘干30 min,跟着板子数量增多时刻相应延伸,如100块板,需求烘3 h,顺次类推;晒干:底部铺一层洁净的A4纸或许吸水纸,倒置板子,在顶层铺一层盖住避光,室温晾18-24h。

5.2 板子单调后,应及时装入自封袋,按照每块板1袋单调剂的量装入,袋子外面写好板子制备日期,放入本成品库冷藏环境保存备用

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