只有不断学习与实验才能逐渐积累经验，做出更好的实验效果。在前面的资xun内容及技术文章中，上海恒远为大家分享许多ELISA试剂盒的操作技巧、要求、方法等相关技术，我公司技术员根据自身多年【ELISA试剂盒实验】经验，整理出的ELISA操作技巧。下面我们一起来看下具体内容，你未必知道的32条ELISA实验秘诀：

    1.加样后及时放人孵箱，标本较多时，要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间，防止孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗*。

    2.显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用。

    3.加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。

    4.合理安排检测量，以免反应板过多造成洗板等待时间长。

    5.液体全部加入酶标孔后，将酶标板放在桌子上平行轻轻摇晃30s，使液体充分混合均匀，也使其得到充分的反应。

    6.洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可经久保存。

    7.吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。

    8.要尽量做双孔实验，这样才既能保证数据的准确性，又能反映出试剂盒的精密度。

    9.为防止样品蒸发，试验时将反应板放于铺有湿布的密闭盒内，酶标板加上盖或覆膜。

    10.未使用完的酶标板或者试剂，请于2-8℃保存。辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液请依据所需的量配置使用。请勿重复使用已稀释过的辣根过氧化物酶标记抗人IgG工作液。

    11.作时必须戴手套，穿工作衣，严格健全和执行消毒隔离制度。

    12.试验结果的判定必须以酶标仪读数为准。

    13.ELISA试剂盒样品稀释液应用加液器加注，并经常校对其准确性。

    14.剩余样品及废弃物应经121℃高压蒸汽灭菌30分钟，或用5.0g/L次氯酸钠等消毒剂处理30分钟后废弃。

    15.不同批号试剂组分不得混用。