我们在ELISA试剂盒实验的时候,我们经常都需要用到封闭液显示液,那么封闭液显示液的配置步骤有哪些呢?今天上海纪宁生物教如何配制封闭液显示液的方法:
1、包被缓冲液(0.05mol/L碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液,pH 9.6):取1.6g碳酸钠及2.9g碳酸氢钠,加双蒸水至1000mL,调pH至9.6。
2、封闭液(1%BSA/PBS溶液):1g BSA,100mL PBS。
3、样本稀释液(PBS,pH7.4):取Na2HPO4.12H2O 68.8g,NaH2PO4 6.9g,NaCl 45g,加双蒸水至1000mL,调节pH至7.4。
4、洗涤液(PBST,pH 7.4):取Na2HPO4.12H2O 68.8g,NaH2PO4 6.9g,NaCl 45g,Tween-20 0.5mL,加双蒸水至1000mL,调节pH至7.4。
底物液A:取无水乙酸钠8.2g,β-糊精2.5g,过氧化氢脲428.6mg,加双蒸水至1000mL,调节pH至5.0,4℃保存,使用时达室温;
底物液B:取100mgTMB溶于10mL DMSO中,棕色瓶保存;
使用前将14.6mL底物液A和0.45mL底物液B混合15min;
终止液:1.25mol/L的H2SO4溶液。
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