ELISA实验方法之直接法仅需要抗原和酶标一抗，操作简便，可避免交叉反应，然而该方法要求酶标一抗有较高的特异性要求，同时也并非所有的一抗适合标记处理。直接法在实际运用中并不多见，它并不能对样本中抗体进行定量分析，因为样本中抗体是非酶标抗体，无法进行后续显色实验五大检测方法中的直接法。

首先，将所有血清IgM（包括异性IgM和非特异性IgM）固定在固相上，在去除IgG后再测定特异性IgM。

操作步骤如下：

⑴将抗人IgM抗体连接在固相载体上，ELISA实验方法之直接法形成固相抗人IgM。洗涤。

⑵加入稀释的血清标本：保温反应后血清中的IgM抗体被固相抗体捕获。洗涤除去其他免疫球蛋白和血清中的杂质成分。

⑶加入特异性抗原试剂：它只与固相上的特异性IgM结合。洗涤。

⑷加入针对特异性的酶标抗体：使之与结合在固相上的抗原反应结合。洗涤。

⑸加底物显色：如有颜色显示，则表示血清标本中的特异性IgM抗体存在，ELISA实验方法之直接法是为阳性反应。