大鼠缺血修饰白蛋白elisa试剂盒使用说明书

公司是一家集销售生化试剂、实验耗材、自产分子生物学产品为一体，并能提供的专业性生物科技公司。公司秉承“以客户为中心，以产品为保障、以诚信为基础、以创新为宗旨"的发展理念，在依靠客户的大力支持和员工的不懈努力下获得了快速的成长。

　　本试剂盒仅供研究使用。
大鼠elisa试剂盒检测范围：

使用目的：
　　本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中缺血修饰白蛋白（IMA）含量。
实验原理
　　本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠缺血修饰白蛋白（IMA）水平。用纯化的大鼠缺血修饰白蛋白（IMA）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入缺血修饰白蛋白（IMA），再与HRP标记的缺血修饰白蛋白（IMA）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的缺血修饰白蛋白（IMA）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠缺血修饰白蛋白（IMA）浓度。 
大鼠elisa试剂盒组成 
1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶
2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 标准品（1200 U/L） 0.5ml×1瓶
3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶
4 样品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份
5 显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张 
6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个
标本要求 
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
大鼠elisa试剂盒操作步骤
标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品zui终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 
配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 
温育：操作同3。
洗涤：操作同5。
显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。