牛牛天天人人综合影院 硫酸葡聚糖(仿肝素)亲和填料的特点和技术指标
产品介绍
NuPerley DexS-HbP 和 NuPerley DexS-VirS 是将硫酸葡聚糖(Dextran Sulfate)键合在新一代高刚性琼脂糖微球 NuPerley 上形成的一种亲和层析分离介质。硫酸葡聚糖又称右旋糖酐硫酸酯,是天然多糖右旋糖酐的合成衍生物,具有与肝素类似的的生物活性,
是一种非动物源的仿肝素配基,填料产品被称为仿肝素亲和填料。NuPerley DexS-HbP 的含硫量相对低(40~80 μmol/mL),可用于蛋白的亲和分离、纯化,例如血浆蛋白。同时,硫酸酯是一种优良的耐盐型阳离子交换配基,NuPerley DexSHbP 也可作为阳离子交换填料,对溶菌酶的结合量大于 60 mg/mL,且在 50~150 mM NaCl盐浓度下仍结合良好。NuPerley DexS-VirS 的含硫量相对高(70~130 μmol/mL),主要用于病毒和病毒样颗粒(VLP)的捕获与纯化。
使用方法参考
色谱柱装填
以下阐述与层析系统连接时,填料的色谱柱装填方法。
(1)所有需要用到的材料的温度要与色谱操作的温度一样,液体最好做脱气处理。装柱液一般为纯水,也可含 10~100 mM NaCl。
(2)填料用量计算:通过沉降定量填料体积,需要的沉降填料体积=柱体积×压缩比(也称压缩因子)。沉降体积是指填料在 20%乙醇保存液中自然沉降完全读取的稳定体积。NuPerley DexS-HbP 和 NuPerley DexS-VirS 的压缩比为~1.10。为使达到装柱比,
可通过柱头下压的方法,也可以通过高流速压柱。
(3)填料清洗:将填料悬液充分摇匀后量取相应体积,抽滤除去液体,并用约 3 倍填料体积的纯化水洗涤,重复 3 次,以除去保存液。
(4)装柱填料悬液准备:将填料转移到适当的容器中,加入适量的装柱液,制成50~75 v%的装柱填料悬液,使用前搅匀。
(5)装填前准备:在清洗干净的层析柱下端加入装柱液,以除去下垫片及层析柱下端的空气,在柱内保留少量的纯水,拧紧下堵头,调整柱子使其垂直于地面。
(6)装填:将搅匀后的填料悬液一次性缓慢倒入层析柱内(必要时使用装柱器),为避免引入气泡,应使之沿层析柱内壁自然流下。将所有填料加入后,用装柱液将装柱器加满,拧紧装柱器上盖,将柱子与层析系统连接。
(7)压柱:使柱内填料自然沉降(或 50~150 cm/h 的低流速下沉降),待填料沉降完全后(填料与液体的界面清晰),去除装柱器,装上上柱头,并将柱头下降至界面处;通过高流速(推荐流速见下表,注意柱压不超过 0.3 MPa),继续压柱至界面清晰稳定,
标记界面稳定时的柱高。停泵,打开柱头上的阀门/堵头,关闭柱底的阀门/堵头,下压柱头至标记位置下方与压缩比对应的位置,旋紧柱头,装柱完成。装柱完成后,需用高流速平衡柱内的填料。
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