曲霉属通用探针法荧光定量PCR试剂盒试剂准备
. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．0×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶操作步骤
．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
0×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物（0pM） 2μl
引物2（0PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） μl
DNA模板（50ng-μg/μl） μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用00μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-0μl电泳检测。
