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男女呻吟久久免费视频 肉毒碱棕榈酰转移酶(CPT)​操作流程描叙

时间:2021/8/31阅读:1396
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肉毒碱棕榈酰转移酶(CPT)操作流程描叙:

         、将要进行实验的版孔进行设定好,标准品 5 个点,每个点设定平行,需要用到 0 个孔,空白只需 个孔。剩下孔可以做为样本孔

         2、 稀释标准,准备好 5 个 EP 管,然后在每个 EP 管中加入 50 微升标准稀释液,编上编码,分别为 ,2,3,4,5,在 号管中加入 50 标准品,用枪头反复吹打 0 次左右(注意控制幅度不要过大容易产生气泡)如果有涡旋仪可以在涡旋仪上涡旋 5 秒左右,然后换枪头,在 号管中取 50 微升加入到 2 号管,后面过程一次类推。最后稀释完,前面 4 个管中每管液体在 50 微升,5 号管为 300 微升。浓度是从大到小。

         3、 标准、样本、空白加样:标准是每个浓度点 2 个孔(做平行),每孔加入 50 微升,加样过程中注意换枪头,样本孔中每孔加入 50 微升,加样过程中注意换枪头,空白孔加入 50 微升标准稀释液或者样本稀释液。特别要说明的是,标准加样和样本加样尽量控制在 5 分钟内加完,如果时间拖的太长,会导致前面孔先反应后面孔才开始反应,这样数值偏差过大。加完样后盖上封板膜,至 37 摄氏度孵育 30 分钟.

        4、洗版,在孵育过程中可以将洗涤液配好,20 ml30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水或者去离子水定容到 600 ml 即可。每孔加入 250-300 微升的洗涤液(不要漫过版孔),(如果有震荡仪的话,可以讲板子放入震荡仪上 5 秒左右,然后静止三十秒,没有请忽略次过程)将板子在桌子上晃动 5 秒左右,然后静置 30 秒,甩干,拍板。说明:甩干过程尽量要快, 秒内就可以完成,不要慢慢倾斜倒掉液体,直接翻板甩掉液体即可。拍板过程需要在桌子上垫一层吸水纸或者滤纸,版孔朝下拍几下,拍干区别主要看吸水纸和滤纸上没有明显的水渍为完成。

         5、每孔加入 50 微升的酶标试剂,此处在空白孔中不需要加(空白孔为空),孵育 30 分钟。

         6、  洗版同步骤 4

         7、显色,先每孔中加入 50 微升的显色 A 液,然后每孔中加入 50  微升显色  B  液。避光 37 摄氏度显色 5 分钟

         8、终止,每孔加入 50 微升的终止液,注意,加完终止液必须在 5  分钟内读数,超过时间读数无效。在规定时间内读数都是有效的。

         9、至此,整个实验结束。

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