2017 07-17

实验室经验总结：细胞培养的污染源有这几个，你造吗？

实验室经验总结：细胞培养的污染源有这几个，你造吗？上海子实生物（细胞之家）广义上来说，凡是细胞培养体系中的外来成分或成分变化，都应视为污染，细胞污染不能*被消除，但能减少其发生的频率和后果的严重性。细...

2017 07-13

Hela细胞的传代

Hela细胞传代步骤1.看培养基是否正常，细胞状态如何，细胞密度如何，决定是否传代。拿出来看的时候把盖子拧上。2．热PBS、versene、培养基，(提前做好)瓶子不要倒着放，不要让液体接触到瓶塞。3...

2017 07-13

细胞传代培养的方法

细胞传代培养（消化法）具体操作：一.传代前准备：1.预热培养用液：把已经配制好的装有培养液、PBS液和*的瓶子放入37℃水浴锅内预热。2.用75％酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。3.正确摆放...

2017 07-12

细胞培养的需要注意的一些问题,部分原因和解决方法

1：培养液pH值变化太快可能原因(1)CO2张力不对(2)培养瓶盖拧得太紧(3)NaHCO3缓冲系统缓冲力不足(4)培养液中盐浓度不正确(5)细菌、酵母或真菌污染建议解决方法(1)按培养液中NaHCO...

2017 07-12

细胞培养的一些问题

细胞培养常见问题1.液体培养基的保存是冷藏好？还是冷冻好？要冷藏！！因为液体培养基经冷冻后再经溶化时，其溶液的pH值会发生改变，溶液往往变碱，某些成分溶解也会受到影响对细胞生长不利。故液体培养基一定要...

2017 07-07

培养基配制

1.配制培养基时*和hepes添加量之间没有必然的。*是必须加的，与培养箱内的二氧化碳（溶解在液体内就是碳酸）形成碳酸缓冲对。而HEPES是两性有机缓冲剂（既可以缓冲酸也可以缓冲碱），其缓冲能力大大高...

2017 07-07

细胞冷冻保存方法、注意事项

1.1.欲冷冻保存之细胞应在生长良好(logphase)且存活率高之状态，约为80–90％致密度。1.2.冷冻前检测细胞是否仍保有其*性质，例如hybridoma应在冷冻保存前一至二日测试是否有抗体之...

2017 07-06

动物细胞培养的基本概念

高等生物是由多细胞构成的整体，在整体条件下要研究单个细胞或某一群细胞在体内（invivo）的功能活动是十分困难的。但是如果把活细胞拿到体外（invitro）培养进行观察和研究，则要方便得多。活细胞离体...

2017 07-06

关于动物血清的常见问题及处理方法

血清是细胞培养中zui重要的元素之一。在实验室操作中要注意及处理方法：1.血清保存:建议血清应保存在-5℃至-2O℃。然而，若存放于4℃时，请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶，建议您无菌分装血清至恰...

2017 07-04

大鼠平滑肌细胞的另一种培养方法

器械显微器械：眼科剪一把，直弯*各一把，细结镊一把，*一把，针头诺干杀老鼠器械：*一把，大镊子一把，弯*一把，*一把，50ml烧杯一个（锡纸包好）另外：10ml离心管两个，培养皿两个，10ml的瓶子三...

2017 07-04

beas-2B细胞与L929细胞培养

beas-2B细胞来源：ATCC。代数：22代，状态上图。培养基：LHC-8（购自GIBCO公司，无需添加任何生长因子）。*：0.05%*（购自sigma的粉剂自己配制）。消化时间：10~30秒，宁愿...

2017 06-28

C2分子

C2的序号似是补体的第2个成分，但在经典激活途径的激活顺序上却在C4以后被活化。C2分子的一级结构已全部搞清楚，它是由723个氨基酸残基组成的单肽链糖蛋白，分子量约110kDa（图5-5）。当C2与已...

2017 06-26

INS-1 cell 的细胞培养

INS-1细胞还是比较好长的，培养条件是RPMI1640+0.11g/LL-Glutamine+0.11g/L丙酮酸钠+5.6MMOL/L葡萄糖+50umol/L2–mercaptoethanol+1...

2017 06-26

25格×16格的血球计数板使用方法介绍

血球计数板介绍用厚玻璃制成。每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数池。计数池两侧各有一支持柱，将特制的盖玻片覆盖其上，形成高0.10mm的计数池。计数池画有长、宽各3.0mm的方格，分为9个大方格，每...

2017 06-17

流式细胞技术实验方法

流式细胞技术实验方法PI染色操作步骤1、将单细胞悬液加入2ml圆底离心管中，离心，1500rpm,5min，弃上清液。2、加入PBS1ml离心洗涤1次，弃上清。3、加入2ml预冷的70%酒精，4℃固定...

2017 06-17

荧光原位杂交原理及步骤

荧光原位杂交/FISH技术服务荧光原位杂交FISH的原理：荧光原位杂交（FluorescenceinsituhybridizationFISH）的基本原理是用已知的标记单链核酸为探针，按照碱基互补的原...

2017 03-21

什么是细胞，细胞是什么？

细胞（英文名：cell）并没有统一的定义，比较普遍的提法是：细胞是生物体基本的结构和功能单位。已知除病毒之外的所有生物均由细胞所组成，但病毒生命活动也必须在细胞中才能体现。一般来说，细菌等绝大部分微生...

2017 03-10

胚胎干细胞培养操作规程

维持ES细胞处于未分化状态：ES细胞培养用含有ESGRO（白血病抑制因子）的高糖培养基来阻止细胞的分化。为细胞提供包被有0.1％明胶的平板作为粘附细胞的基质。建议每2－3天从达到80％－90％融合的平...

2017 03-01

细胞保种心得

细胞采购的运输形式一般分为两种，一种是直接寄送冻存细胞，一种是复苏后寄送活细胞。前者是由液氮中取出细胞冻存管，采用干冰运输；后者是将细胞复苏至T-25培养瓶中，采用常温运输。两者各有优缺点，*种方式的...

2017 02-16

骨髓间充质干细胞（BMSCs）培养以及成脂、成骨诱导分化

一，C57小鼠BMSCs原代培养1，实验前准备好相关手术器械，培养器材及相关试剂PBS平衡缓冲液、10％FBS，IMDM培养基。2，脱颈法处死C57小鼠，在75％乙醇中浸泡5min，转移至超净工作台中...