污水处理设备 污泥处理设备 水处理过滤器 软化水设备/除盐设备 纯净水设备 消毒设备|加药设备 供水/储水/集水/排水/辅助 水处理膜 过滤器滤芯 水处理滤料 水处理剂 水处理填料 其它水处理设备
上海钰博生物科技有限公司
上海钰博生物科技有限公司
阅读：314发布时间：2018-1-23
根据噬菌斑数计算病毒滴度。
1. 4% agarose gel：2g agrose 50ml 水，高压灭菌
2. 2×Grace（unsupplemented）：9.14g粉末（invitrogen） 0.07gNaHCO3 H2O，调PH6.1，定容至100ml，无菌过滤
3. supplemented Grace：1×Grace添加3.33mg/ml Lactalbumin，3.33mg/ml yeastolate，无菌过滤
4. 高温灭活FBS
1. 6孔板
2. 12ml离心管
3. 100ml无菌玻璃瓶
4. 无菌吸管
5. 70℃水浴锅
杆状病毒， SF9：5×105cells/ml
1. 无菌条件下，2ml/孔细胞（5×105cells/ml）种入6孔板，室温孵育1h使其贴壁，孵育后镜检其贴壁程度；
2. 将4% agarose gel放入70℃水浴锅融解，空100ml无菌瓶与2×Grace放入40℃水浴锅预热；
3. 将杆状病毒用无血清supplemented Grace梯度稀释：10-1~10-8。
4. 弃6孔板内上清，快速加入稀释好的病毒，1ml/孔，复孔，室温孵育1h。
5. 配置上层琼脂：加20ml高温灭活FBS到2×Grace 100ml，25ml 2×Grace（含FBS） 12.5ml 无菌水 12.5ml 4% agarose gel，至预热的100ml无菌瓶，轻轻混匀，放入37℃水浴锅备用；
6. 弃6孔板内上清，快速加2ml上层琼脂，以防菌层干燥，静置10-20min使其凝固；
7. 将6孔板放入27℃培养箱，培养4－10天；
8. 计数板中噬菌斑，直至连续两天无变化，加1mg/ml中性红0.5ml，室温孵育2h后计数噬菌斑。
注：
病毒滴度（pfu/ml）=1/稀释倍数×噬菌斑数×1/每孔接种体积
环保在线 设计制作，未经允许翻录必究 .
请输入账号
请输入密码
请输验证码
请输入你感兴趣的产品
请简单描述您的需求
请选择省份