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ELISA实验的原理和常见办法

2021-8-11  阅读(3031)


ELISA实验是科研人员经常用到的实验方法。很多人觉得ELISA很简单,其实不然。现在我们一起了解下ELISA实验的原理和常见办法。


实验原理:

 1.包被:抗原/抗体,固相化
 2.反响: 1)待测抗体/抗原; 2)酶标抗原/抗体
 3.洗涤:使结合在固相上的抗原抗体复合物与未结合的别离
 4.底物显色:定性/定量剖析
 

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常用办法:
 1. 间接法
 检测抗体常用的办法, 首要用于对病原体抗体的检测。
 优势:二抗能够加强信号,并且有多种挑选能做不同的测定剖析。不加酶符号的一级抗体则能保留它多的免疫反响性。
 缺陷:交互反响发生的机率较高
 2. 双抗体夹心法
 检测大分子抗原常用的办法。
 优势:高活络、高专一性,抗原无须事前纯化。
 缺陷:抗原必定得具有两个以上的抗体结合部位。
 3. 竞争法
 检测小分子半抗原(药物、激素等)。
 优势:可适用比较不纯的样本,并且数据再现性很高。
 缺陷:全体的敏感性和专一性都较差。



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