TTC，即2,3,5-氯化三苯基四氮唑，是一种脂溶性光敏感复合物。它是呼吸链中吡啶-核苷结构酶系统的质子受体，能与正常组织中的脱氢酶反应，生成红色的甲臜(三苯基甲臢，TTF)，该物质不溶于水，因此可以用来表示细胞的活力。而缺血或坏死的组织内脱氢酶活性下降或丧失，不能与TTC反应，故不会产生颜色变化，保持苍白。
基本原理
化学作用：
TTC(Triphenyltetrazolium chloride)是一种无色可溶性化合物，可被活细胞中的脱氢酶(如琥珀酸脱氢酶)还原，生成红色不溶性的三苯甲臜(Formazan)。
反应式：
TTC(无色) + 脱氢酶(活性细胞) → Formazan(红色沉淀)
关键条件：依赖细胞线粒体功能，仅存活且代谢活跃的组织能完成此反应。
染色结果判读：
红色区域：活细胞(脱氢酶活性正常)。
白色/苍白色区域：坏死或凋亡细胞(脱氢酶失活，无法还原TTC)。
实验步骤
样本准备：
组织类型：心肌、脑、肝脏等(常用于缺血再灌注损伤模型)。
处理要求：新鲜样本(避免固定)，迅速切片(厚度通常为1-2 mm)。
TTC溶液配制：
常用浓度：1-2% TTC溶于生理盐水或PBS(pH 7.4)。
避光保存：TTC对光敏感，需现用现配或短期4℃避光储存。
染色流程：
将组织切片浸没于TTC溶液中，37℃避光孵育15-30分钟(具体时间依组织类型调整)。
翻转组织确保均匀接触。
终止反应：PBS漂洗，4%多聚甲醛或10%福尔马林固定(可选)。
观察与记录：
肉眼或显微镜下观察，红色为存活区，白色为坏死区。
定量分析：使用图像分析软件(如ImageJ)计算坏死区域占比。
