牛牛天天人人综合影院灭活内源性酶及封闭内源性*

时间：2013-12-26阅读：639

在生物体组织内均含有一定量的内源性酶和内源性*，如富含血细胞的组织标本有大量具有活性的过氧化物酶，肝、脾、肾、脑及胚胎组织中富含*。如采用过氧化物酶检测系统或碱性磷酸酶和NBT/BCIP显色系统进行免疫组织化学染色时．酶的作用是催化底物，使显色剂显色，而组织中的内源性酶同样也能催化底物，使其显色，这就影响免疫组织化学染色的特异性。在使用亲和素试剂的免疫组织化学染色中，内源性*易结合亲和素，形成亲和素一*复合物，导致假阳性。所以在染色之前应设法将组织内的内源性酶灭活或将内源性*封闭，以保证染色的特异性。

(1)灭活内源性过氧化物酶：将组织在3％甲醇―H₂ O₂ (3ml纯甲醇中加入30％H₂ 0₂ 0．3ml，现用现配)中室温浸泡10分钟，继而用PBS冲洗3次，每次5分钟。

(2)灭活碱性磷酸酶：zui常用的方法是将左旋咪唑(以每毫升加24mg)加入底物液中并保持pH为7．6～8．2，可除去大部分内源性碱性磷酸酶，对于仍能干扰染色的酸性磷酸酶可用0．05mol/L酒石酸抑制。

(3)封闭内源性*：将组织切片用0．0l％亲和素溶液室温处理10～20分钟，使其结合位点饱和，以消除内源性*的活性。也可购买*阻断剂试剂盒，其中A液为亲和素．B液为*。使用时加A液l滴，室温10分钟，PBS冲洗3次，每次2分钟；加B液1滴。室温10分钟．PBS冲洗3次，每次2分钟。

源叶标准品网

源叶标准品网

牛牛天天人人综合影院灭活内源性酶及封闭内源性*

收藏该商铺

提示

源叶标准品网

源叶标准品网

牛牛天天人人综合影院 灭活内源性酶及封闭内源性*

会员登录

收藏该商铺

提示

牛牛天天人人综合影院灭活内源性酶及封闭内源性*