机体内具有吞噬功能的细胞称为吞噬细胞,它们是机体天然抵抗力的一个重要组成部分。人类吞噬细胞包括外周血中的中性粒细胞、单核细胞以及多种组织中的巨噬细胞,它们吞噬和杀灭侵入人体各部位的病源微生物和人体各部位衰老、损伤或癌变细胞。因此,吞噬细胞数量减少或功能障碍都会导致非特异性免疫缺陷,检测其功能有助于诊断某些疾病和判断机体非特异性免疫水平。
血液中的中性粒细胞通过趋化、调理、吞入和杀菌等几个步骤,来吞噬和消化衰老、死亡细胞及病源微生物等异物。
【材料】
1. 白色葡萄球菌8小时培养物,用生理盐水制成菌悬液,并离心洗涤2次,用标准比浊管
比浊,使菌体浓度达到5×108个/ml。
2. 肝素,生理盐水,瑞氏染液。
3. 载玻片,滴管,血清瓶。
4. 小白鼠1~2只。
【方法】
1. 从小白鼠眼内取血2ml左右,放入加有肝素(1%)数滴的血清瓶内,然后在血清瓶内
加入等体积的白色葡萄球菌菌悬液,轻轻混合后,放入37℃水浴孵育30分钟,每15分钟摇匀一次。
2. 取血清瓶中白细胞层(即沉淀的红细胞表层)白细胞悬液1滴,滴在载玻片一端,然后
用另一块载玻片将这滴悬液推向另一端,成为一薄层。
3. 在薄层上滴数滴瑞氏染液,染色1分钟;然后加等量蒸馏水,轻轻吹打,与瑞氏染液混
合染5分钟后水洗晾干(水洗时为防止染液结晶沉着,应加满水后再倾斜倒掉水)。
4. 用油镜检查中性粒细胞的吞噬情况(见图1-2)。
【结果判断】
1. 吞噬百分数 计数100个中性粒细胞中吞噬白色葡萄球菌的细胞数。
2. 吞噬指数 计数100个中性粒细胞中被吞噬的细菌总数,平均每个中性粒细胞吞噬的细
菌数。
中性粒细胞的吞噬作用
图1-1中性粒细胞是数量zui多的白细胞。其突出特点是细胞核分叶,常分2-5叶(b-d),叶间有染色质细丝相连;也有的呈杆状核(a)。一般认为,核分叶越多,细胞越衰老。中性粒细胞的另一特点为淡红色的胞质内含细小的淡紫色及淡红色颗粒。前者较大,为嗜天青颗粒,光镜下易见;后者为特殊(中性)颗粒,较小,因染色很淡而难以观察。血涂片,Giemsa染色。