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男女呻吟久久免费视频 细胞分裂指数测定

时间:2014/11/21阅读:710
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一、原理

体外培养细胞生长、分裂繁殖的能力,可用分裂指数来表示。它与生长曲线有一定的,如随着分裂指数的不断提高,细胞也就进入了指数生。

分裂指数指细胞群体中分裂细胞所占的百分比,它是测定细胞周期的一个重要指标,也是不同实验研究选择细胞的重要依据。

二、仪器、用品与试剂

1、仪器与用品:CO2培养箱、普通显微镜、细胞培养血、盖玻片、吸管

2、试剂:培养液、、甲醇、冰醋酸、Giemsa染液

三、操作步骤

1、消化细胞,将细胞悬液接至内含盖玻片的培养皿中。

2、CO2培养箱中培养48小时,使细胞长在盖片上。

3、取出盖片,按下列顺序操作:

PBS漂洗3分钟→甲醇:冰醋酸=3:1固定液中固定30分钟→Giemsa液染色10分钟→自来水冲洗。

4、盖片晾干后反扣在载玻片上,镜检。

5、计算:

分裂指数=分裂细胞数/总细胞数×

四、注意事项

操作时动作要轻,以免使盖片上的细胞脱落。

附:Giemsa染液配制:

称Giemsa粉末0.5克,加几滴甘油研磨,再加入甘油(使加入的甘油总量为33ml)。56℃中保温90-120分钟。加入33ml甲醇,置棕色瓶中保存,此为Giemsa原液。

使用时按要求用PBS稀释。一般稀释10倍。

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