女人天天干夜夜爽视频 可溶性包涵体蛋白复性（化学稀释I）试剂盒产品说明书

【资料简介】

可溶性包涵体 蛋白复性（化学稀释I）试剂盒 产品说明书

主要用途

可溶性包涵体 蛋白复性（化学稀释I）试剂 是一种旨在 使 用化学稀释方法，使可溶性变性纯化蛋白重新折叠，恢复其蛋白功能和活性的 而经典的技术方法。该技 术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种可溶性纯化蛋白，尤其是细菌内重组蛋白（融合蛋白）以及可溶性处理的包涵体蛋白。可后续用于蛋白功能、酶活性等分析。产品即到即用，性能稳定，参数优化，操作便捷，复性效果理想。

技术背景

在蛋白纯化和融化过程中，特别是包涵体蛋白，变性剂（denaturant）提供了zui有效的手段，其获得的纯化蛋白属于变性蛋白（denatured protein）。为了使变性蛋白恢复为天然蛋白（native protein），即具有蛋白质的自然结构和活性，需要进行蛋白复性（renaturation）或重新折叠（refolding）。蛋白复性是一个复杂的过程，诸如pH、离子强度、低分子添加剂、氧化还原电位（redox potential）和温度等物化因子，影响体外蛋白复性的效率。通常体外复性的方法包括稀释法和缓冲交换法。前者通过化学处理，而后者采用物理方法（例如透析、膜过滤（diafiltration）、凝胶过滤层析（gel-filtration chromatography）等，以达到蛋白复性的效果。 L-精氨酸（ L－arginine）、 聚乙二醇（ PEG）、 硫代甜菜碱（ sulfobetaine）、去垢剂、变性剂等将影响化学稀释复性处理的效率。

产品内容

稀释液（Reagent A） 10毫升

还原液（Reagent B）       5毫升

平衡液（Reagent C）       5毫升

产品说明书 1份

保存方式

保存在 -20 ℃ 冰箱里， 避免光照，有效保证 6 月

用户自备

1.5 毫升离心管：用于样品保存的容器

恒温摇床：用于反应孵育

实验步骤

方法一：还原复性

• 准备好可溶性纯化变性蛋白样品
• 移取适量的蛋白样品到 1.5 毫升离心管
• 加入适量的 稀释液（ Reagent A ） 调整蛋白浓度到 10 毫克 / 毫升
• 移取 100 微升蛋白样品到新的 1.5 毫升离心管
• 加入 900 微升 还原液（ Reagent B ）
• 放进 20 ℃ 恒温摇床孵育 4 小时，速度为 200RPM
• （选择步骤）移取 10 微升进行生物检测，例如蛋白功能或活性：比色法、 HPLC 、受体结合实验等确定复性蛋白活性值
• 即刻放进－ 70 ℃ 冰箱里保存

方法二：平衡复性

1 ．准备好可溶性纯化变性蛋白样品

2 ．移取适量的蛋白样品到 1.5 毫升离心管

• 加入适量的 稀释液（ Reagent A ） 调整蛋白浓度到 5 毫克 / 毫升
• 移取 5 微升蛋白样品到新的 1.5 毫升离心管
• 加入 195 微升 平衡液（ Reagent C ）
• 放进 28 ℃ 恒温摇床孵育 2 小时，速度为 200RPM
• （选择步骤）移取 10 微升进行生物检测，例如蛋白功能或活性：比色法、 HPLC 、受体结合实验等确定复性蛋白活性值
• 即刻放进－ 70 ℃ 冰箱里保存

注意事项

• 本产品为 5 次操作（还原和平衡各 5 次）
• 操作时须戴手套
• 本产品的复性效率达 15 至 30 ％
• 建议与本公司系列 包涵体蛋白溶解试剂 盒配套使用
• 由于样品的特异性，用户可以优化温度、孵育时间、蛋白浓度，以获得zui大复性效率
• 如果复性效率过低，建议使用 可溶性包涵体蛋白复性（物理透析）试剂盒－ HL 30044.5
• 如果获得满意的复性效果，用户可以按比例扩大复性容量
• 本公司提供系列包涵体蛋白处理试剂产品

质量标准

• 本产品经鉴定性能稳定
• 本产品经鉴定无蛋白酶污染