人单纯疱疹病毒Ⅰ型抗体（HSVⅠ-Ab）ELISA试剂盒操作说明

【资料简介】

人单纯疱疹病毒Ⅰ型抗体（HSVⅠ-Ab）ELISA试剂盒组成：

30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶
酶标试剂 6ml×1瓶
酶标包被板 12孔×8条
样品稀释液 6ml×1瓶
显色剂A液 6ml×1瓶
显色剂B液 6ml×1/瓶
终止液 6ml×1瓶
阳性对照 0.5ml×1瓶
阴性对照 0.5ml×1瓶
说明书 1份
封板膜 2张
密封袋 1个

人单纯疱疹病毒Ⅰ型抗体（HSVⅠ-Ab）ELISA试剂盒操作步骤：
1. 编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）

2. 加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.
10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
人单纯疱疹病毒Ⅰ型抗体（HSVⅠ-Ab）ELISA试剂盒计算和结果判定：
试验有效性：阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.10
临界值（CUT OFF）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15
阴性判定：样品OD值< 临界值（CUT OFF）者为人单纯疱疹病毒Ⅰ型抗体（HSVⅠ-Ab）阴性
阳性判定：样品OD值≥ 临界值（CUT OFF）者为人单纯疱疹病毒Ⅰ型抗体（HSVⅠ-Ab）阳性