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男女呻吟久久免费视频 兔 Lp-PLA2 酶联免疫分析(ELISA)

2012年03月26日 10:35:12人气:277来源:上海研辉生物科技有限公司

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关 键 词 男女呻吟久久免费视频 兔 Lp-PLA2 酶联免疫分析(ELISA)
【资料简介】

兔脂蛋白磷脂酶A2 (Lp-PLA2)酶联免疫分析( ELISA

试剂盒使用说明书

本试剂盒仅供研究使用。

药品名称:

通用名: 兔脂蛋白磷脂酶 A2 (Lp-PLA2) 酶联免疫 分析试剂盒

使用目的:

本试剂盒用于测定兔血清,血浆及相关液体样本中 脂蛋白磷脂酶 A2 (Lp-PLA2) 含量。

实验原理

本试剂盒应用间接法测定标本中兔脂蛋白磷脂酶 A2 (Lp-PLA2) 水平。用纯化的兔脂蛋白磷脂酶 A2 (Lp-PLA2) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入已知浓度的脂蛋白磷脂酶 A2 (Lp-PLA2) 标准品和未知浓度的 Lp-PLA2 待检样品, 温育后,加入*标记的抗 IgG 抗体, 再与链霉亲和素 -HRP 结合,形成免疫复合物,经过*洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的脂蛋白磷脂酶 A2 (Lp-PLA2) 呈正相关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度( OD 值),通过标准曲线计算样品中兔脂蛋白磷脂酶 A2 (Lp-PLA2) 浓度。

试剂盒组成

1

20 倍浓缩洗涤液

50ml × 1

9

标准品 S1 180 μg/L

0.5ml × 1

2

链霉亲和素 -HRP

6ml × 1

标准品 S2 120 μg/L

0.5ml × 1

3

酶标包被板

12 孔× 8

标准品 S3 60 μg/L

0.5ml × 1

4

*标记的抗 -IgG 抗体

6ml × 1

标准品 S4 30 μg/L

0.5ml × 1

5

显色剂 A

6ml × 1

标准品 S5 15 μg/L

0.5ml × 1

6

显色剂 B

6ml × 1/

10

密封袋

1

7

终止液

6ml × 1

11

封板膜

3

8

样品稀释液

6ml × 1

12

说明书

1

标本要求

1 不能检测含NaN3的样品 ,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的( HRP )活性。

2. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可 将标本放于 -20 保存,但 应避免反复冻融

操作步骤

1. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。

2. 加样: 分别设空白孔(空白对照孔不加样品,其余各步操作相同)、标准品孔、 待测样品孔。然后在标准品孔中加入标准品 50μl 在样本反应孔中先加入待测样品 10μl 再加入样品稀释液 40μl (样品zui终稀释度为 5 倍),盖上封板膜,轻轻振荡混匀, 37 温育 45 分钟。

3. 配液:将 20 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 20 倍稀释后备用

4. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重复 4 次,拍干。

5. 加*标记的抗 -IgG 抗体:每孔加入*标记的抗 -IgG 抗体 50μl 37 温育 30 分钟

6. 洗涤:操作同 4

7. 加链霉亲和素 -HRP :每孔加入 50μl 的链酶亲和素 -HRP ,轻轻振荡混匀, 37 温育 30 分钟。

8. 洗涤:操作同 4

9. 显色:每孔先加入显色剂 A 50μl ,再加入显色剂 B 50μl ,轻轻震荡混匀, 37 避光显色15分钟.

10. 终止:每孔加终止液 50μl ,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零, 450nm 波长依序测量各孔的吸光度( OD 值)。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。

计算

以标准物的浓度为横坐标, OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的 OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与 OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的 OD 值待入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。

注意事项

1 .试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2 .浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3 .各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在 5 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4. 如标本中待测物质含量过高(样本 OD 值大于标准品孔*孔的 OD 值),请先将样本稀释一定倍数( n 倍)后再测定,计算时请zui后乘以稀释倍数( ×5×n )。

5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6 .本试剂不同批号组分不得混用。显色剂 B 请避光保存。

7 .严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准 .

8 .所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

线形范围:

10 μg/L -200 μg/L

规格:

96 人份 /

保存条件及有效期

1 .试剂盒保存: 2 -8

2 .有效期: 6 个月

上海研辉生物科技有限公司是国内主要供应商之一,公司代理了不同品牌价格档次的ELISA试剂盒。数万种抗体 耗材 试剂等, 品种多,质量好,灵敏度高,价格实惠,可免费提供代测服务(为您节省时间)咨询: ,
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