女人天天干夜夜爽视频 喹乙醇（olaquindox）快速检测试剂盒说明书

【资料简介】

喹乙醇（ olaquindox ）快速检测试剂盒说明书

一、 原理

本试剂盒采用间接竞争 ELISA 方法检测等样本中的 喹乙醇 ，在微孔条上预包被上偶联抗原，利用抗原与抗体的特异性免疫化学反应的原理来进行的，样本中的 喹乙醇 和微孔条上预包被偶联抗原竞争抗 喹乙醇 抗体，加入酶标记物后，用 TMB 底物显色，样品中的 喹乙醇 含量与样品的吸光度值呈反比，与标准曲线比较即可得出 喹乙醇 含量。

二、 试剂盒技术指标：

试剂盒灵敏度 ： 1ppb

样本检测下限：

组 织 —————————————1ppb

饲 料 ————————————100ppb

交叉反应率 ：

喹乙醇 ——————————————— 100%

卡巴多 —————————————— ﹤7%

回收率 ：

组 织 ———————————— 80% ±10%

饲 料 ———————————— 80% ±15%

三、试剂盒组成

1、 微量测试孔：每条 8 孔，一板 12 条

2、 标准溶液 X6 瓶：（ 1ml/ 瓶） 0ppb 、 1ppb 、 3ppb 、 9ppb 、 27ppb 、 81ppb

3、 酶标记物 12m l ……………… 红色帽

4、 抗体工作液 7ml ……………… 蓝色帽

5、 底物 A 液 7 m l ………………… 白色帽

6、 底物 B 液 7 m l ………………… 黑色帽

7、 终止液 7 m l ………………… 黄色帽

8、 20X 浓缩洗涤液 40 m l …………… 白色帽

9、 2X 浓缩复溶液 50 m l …………… 透明帽

四、 所用仪器、试剂

具备的仪器： 微孔 酶标仪、 氮气吹干装置、 打印机、均质器 、振荡器、离心机、恒温箱、天平（感量 0.01g ）、 刻度移液管

微量移液器：单道 20 µl -200 µl 、 100 µl -1000 µl 、多道250µl

试 剂：乙腈、正己烷

五、样本前处理步骤

样本处理前须知

处理任何样本时 ，都必须注意：

（a）实验中必须使用一次性吸头，在吸取不同的试剂时要更换吸头。

（b）实验之前须检查各种实验器具是否干净，必要时可对实验器具进行清洁，以避免污染干扰实验结果。

（ a ）组织（ 猪肝、猪肉、鱼、虾等）样本的处理方法

1、 称 2 ± 0.05g 组织，加入 10ml 无水乙腈，振荡 5min, 室温 4000r/min 以上离心 10min 。

2、 取上清液 5ml 于 5 0 ℃氮气或空气下 吹干。

3、 用2ml正己烷溶解干燥物，用1ml已稀释

好 的复溶液 （2X 浓缩复溶液与去离子水 1:1

稀释 ） 充分混合 30s ； 4000r/min 以上

离心5min。

4、 取 50 µl 进行分析。

样本稀释倍数： 1

（ b ） 饲料样品的处理方法

1、 将饲料样品研碎，称 1.0± 0.05g 研碎的饲料

样品，加入 2g Al₂O₃ ，然后加入 5ml 乙腈，

剧烈震荡 2min ，室温避光静置 8min ，取出

上清液 50ul 与 已稀释好 的复溶液 950ul （2X

浓缩复溶液与去离子水 1:1 稀释 ） ，混匀，

25 ℃ ， 4000r/min, ；离心 5min 。

2、 取 50ul 上清 进行分析 。

样本稀释倍数 : 100

六、酶标免疫分析程序

1、 将所需试剂从冷藏环境中取出，置室温（ 20-25 ℃ ）平衡30min 以上 , 注意每种液体试剂使用前均须摇匀。

2、 按需要取出微孔条及板架，将不用的微孔放入自封袋，保存于 2-8 ℃ 。

3、 配液：将 40ml 浓缩洗涤液（ 20 倍浓缩）用去离子水按照 1 ： 19 稀释（ 1 份浓缩洗涤液 +19 份去离子水），或按所需用量配制洗涤液。

4、 编号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样品和标准品做 2 孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。

5、 加标准品 / 样本 50 µ l/ 孔到各自的微孔中，再加入 50 µ l/ 孔的抗体工作液，用盖板膜盖板，轻轻振荡混匀， 37 ℃ 环境反应 30min 。

6、 取出微孔板，甩出孔内液体，用 洗涤液 按 250μl / 孔洗板 4 - 5 次，每次浸泡 15-30 秒，用吸水纸拍干 .

7、 酶标记物：加入酶标记物100µl/孔，用盖板膜封板， 37℃ 环境中反应30min 。取出酶标板，如前述洗板5次。

8、 显色：每孔先加入底物液 A 液 50 µ l ，再加 B 液 50 µ l ，轻轻振荡混匀， 37 ℃ 环境中避光显色 15min 。

9、 测定：每孔加入终止液 50 µ l ，轻轻振荡混匀，设定酶标仪于 450nm 处（建议用双波长 450/630nm 检测，在 5min 内读完数据），测定吸光度值（ OD 值）。

七、结果判定

结果判定有两种方法，粗略判定可用第1种方法，定量判定用第2种方法。注意样本吸光值与其所含 喹乙醇 的含量成负相关。

1、 粗略判定：

用样品的平均吸光度值与标准值比较即可得出样本所含 喹乙醇 浓度范围（ng/ml）。假设样品1的吸光度值为0.313，样品2的吸光度值为1.032，标准液吸光度值分别是：0ppb为1.892；1ppb为1.501；3ppb为1.175； 9ppb为0.751； 27ppb为0.421； 81ppb为0.198。则样品1的浓度范围是27ppb-81ppb；样品2的浓度范围是3ppb-9ppb。乘以其对应的稀释倍数即为样本中喹乙醇实际浓度。

2、 定量分析：

所获得的每个浓度标准溶液和样本吸光度值的平均值（B）除以*个标准（0标准）的吸光度值（B₀ ）再乘以100%，即百分吸光度值。

百分吸光度值（%）＝	B	×100%
	B0

B —标准溶液或样本溶液的平均吸光度值

B₀ —0ng/ml标准溶液的平均吸光度值

以标准品百分吸光率为纵坐标，以 喹乙醇 标准品浓度（ng/ml）的半对数为横坐标，绘制标准曲线图。将样本的百分吸光率代入标准曲线中，从标准曲线上读出样本所对应的浓度，乘以其对应的稀释倍数即为样本中喹乙醇实际浓度。

若利用试剂盒专业分析软件进行计算，更便于大量样品的准确、快速分析。

八、注意事项

1、 用前将所有试剂温度回升至室温20-25℃。

2、 用之后立即将所有试剂放回2-8℃冰箱。

3、 在ELISA分析中的再现性，很大程度上取决于洗板的一致性，仔细按照推荐的洗板顺序操作是ELISA测定程序中的要点。

4、 所有恒温孵育过程中，避免光线照射，用盖板膜封住微孔板。

5、 室温低于25℃或试剂及标本没有回到室温（20-25℃）会导致所有标准的OD值偏低。

6、 在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况，则会伴随着出现标准曲线不成线性，重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。

7、 混合要均匀，否则会出现重复性不好的现象。

8、 反应终止液为 2M 硫酸，避免接触皮肤。

9、 不要使用过了有效日期的试剂盒，稀释或搀杂使用会引起灵敏度、OD值的变化。不要交换使用不同批号的盒中试剂。

10、 不用的微孔板放进自封袋重新密封；标准物质和无色的发色剂对光敏感，因此要避免直接暴露在光线下。

11、 显色液若有任何颜色表明变质，应当弃之。0标准的吸光度值小于0.5时，表示试剂可能变质。

12、 该试剂盒*反应温度为 37 ℃ ，温度过高或过低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化 。

九、储藏条件和保质期

储藏条件：试剂盒于2-8℃保存，不要冷冻。

保 质 期：该产品有效期为1年，生产日期见包装盒。

提示：酶标板真空包装袋若有漏气，酶标板仍然正常有效，不影响实验结果，请放心使用。