人心肌特异性肌钙蛋白T（cTnT）elisa试剂盒使用说明书厂家

【资料简介】

人心肌特异性肌钙蛋白T（cTnT） elisa 试剂盒 使用说明书

Elisa kit 规格： 48 孔配置 /96 孔配置

标准品稀释液： 1.5ml × 1 瓶

酶标试剂： 3 ml × 1 瓶（ 48 ） /6 ml × 1 瓶（ 96 ）

【人心肌特异性肌钙蛋白T（cTnT）elisa试剂盒】 本试剂仅供研究使用

计算：

以标准物的浓度为横坐标， OD 值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的 OD 值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与 OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的 OD 值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

试剂盒组成 ：

封板膜 :2 片（ 48 ） /2 片（ 96 ）

说明书 :1 份

密封袋 :1 个

标准品： 2700ng/L 0.5ml × 1 瓶 0.5ml × 1 瓶 2-8 ℃保存

酶标包被板 : 1 × 48 1 × 96 2-8 ℃保存

样品稀释液 : 3ml × 1 瓶 6 ml × 1 瓶 2-8 ℃保存

显色剂 A 液 : 3ml × 1 瓶 6 ml × 1 瓶 2-8 ℃保存

显色剂 B 液 : 3ml × 1 瓶 6 ml × 1 瓶 2-8 ℃保存

终止液 : 3ml × 1 瓶 6ml × 1 瓶 2-8 ℃保存

浓缩洗涤液 : （ 20ml × 20 倍）× 1 瓶 （ 20ml × 30 倍）× 1 瓶 2-8 ℃保存

操作步骤

1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔 10 孔，在*、第二孔中分别加标准品 100μl ，然后在*、第二孔中加标准品稀释液 50μl ，混匀；然后从*孔、第二孔中各取 100μl 分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液 50μl ，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取 50μl 弃掉，再各取 50μl 分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液 50ul ，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取 50μl 分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液 50μl ，混匀后从第七、第八孔中分别取 50μl 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液 50μl ，混匀后从第九第十孔中各取 50μl 弃掉。（稀释后各孔加样量都为 50μl ，浓度分别为 1800ng/L ， 1200ng/L ， 600ng/L ， 300ng/L ， 150ng/L ）。

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液 40μl ，然后再加待测样品 10μl （样品zui终稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

3. 温育：用封板膜封板后置 37 ℃ 温育3 0 分钟。

4. 配液：将 30 （ 48T 的 20 倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 （ 48T 的 20 倍）倍稀释后备用。

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此重复 5 次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂 50μl ，空白孔除外。

7. 温育：操作同 3 。

8. 洗涤：操作同 5 。

9. 显色：每孔先加入显色剂 A50μl ，再加入显色剂 B50μl ，轻轻震荡混匀， 37 ℃ 避光显色15分钟.

10. 终止：每孔加终止液 50μl ，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

11. 测定：以空白空调零， 450nm 波长依序测量各孔的吸光度（ OD 值）。 测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。

【人心肌特异性肌钙蛋白T（cTnT）elisa试剂盒】 注意事项：

1． 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2． 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

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