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男女呻吟久久免费视频 辣根过氧化物酶标记兔抗人可溶性纤维蛋白原抗体IgG

2013年02月28日 16:16:59人气:243来源:上海安研商贸有限公司

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【资料简介】

男女呻吟久久免费视频 辣根过氧化物酶标记兔抗人可溶性纤维蛋白原抗体IgG

Rabbit Anti-human Fibrinogen/HRP  男女呻吟久久免费视频 辣根过氧化物酶标记兔抗人可溶性纤维蛋白原抗体IgG
Anti-TY3H/FITC (Tyrosine Hydroxylase )  荧光素标记*羟化酶抗体IgG
Anti-Tyrosinase/FITC  荧光素标记*酶抗体IgG
Anti-Tβ10/FITC  荧光素标记*β10抗体IgG
Anti-UAT/FITC  荧光素标记尿酸盐转运子抗体IgG
Anti-Ubiquitin/FITC  荧光素标记泛素蛋白抗体IgG
Anti-UCN/FITC  荧光素标记新型血管活性因子UCN抗体(人)IgG
Anti-UCN/FITC  荧光素标记新型血管活性因子UCN抗体(小鼠、大鼠)IgG
Anti-UCP-1/FITC  荧光素标记线粒体脱偶连蛋白1抗体IgG
Anti-UCP-2/FITC  荧光素标记线粒体脱偶连蛋白2抗体IgG
Anti-UCP-3/FITC  荧光素标记线粒体脱偶连蛋白3抗体IgG
Anti-UG/FITC  荧光素标记子宫珠蛋白抗体IgG
Anti-URGCP/URG4/FITC  荧光素标记乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗体IgG
Anti-URGCP/URG4/FITC  荧光素标记乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗体C端IgG
Anti-USF-1/FITC  荧光素标记上游刺激因子1抗体IgG
Anti-VAMP-1/FITC  荧光素标记囊泡相关膜蛋白1抗体IgG

制备过程

1 、免疫动物 免疫动物是用目的抗原免疫小鼠,使小鼠产生致敏 B 淋巴细胞的 过程。 一般选用 6-8 周龄雌性 Balb/c 小鼠,按照预先制定的免疫方案进行免疫注射。 抗原通过血液循环或淋巴循环进入外周免疫器官,刺激相应 B 淋巴细胞克隆,使其活化、增殖,并分化成为致敏 B 淋巴细胞 [1]

2 、细胞融合 采用眼球摘除放血法处死小鼠,无菌操作取出脾脏,在平皿内挤压研磨,制备脾细胞悬液。 将准备好的同系骨髓瘤细胞与小鼠脾细胞按一定比例混合,并加入促融合剂聚乙二醇。在聚乙二醇作用下,各种淋巴细胞可与骨髓瘤细胞发生融合,形成杂交瘤细胞。

3 、选择性培养 选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤细胞,一般采用 HAT 选择性培养基。在 HAT 培养基中,未融合的骨髓瘤细胞因缺乏次黄嘌呤 - * - 磷酸核糖转移酶,不能利用补救途径合成 DNA 而死亡。 未融合的淋巴细胞虽具有次黄嘌呤 - * - 磷酸核糖转移酶,但其本身不能在体外长期存活也逐渐死亡。 只有融合的杂交瘤细胞由于从脾细胞获得了次黄嘌呤*磷酸核糖转移酶,并具有骨髓瘤细胞能无限增殖的特性,因此能在 HAT 培养基中存活和增殖。

4 、杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化 HAT 培养基中生长的杂交瘤细胞,只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞,因此,必须进行筛选和克隆化。通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。采用灵敏、快速、特异的免疫学方法,筛选出能产生所需单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞,并进行克隆扩增。经过全面鉴定其所分泌单克隆抗体的免疫球蛋白类型、亚类、特异性、亲和力、识别抗原的表位及其分子量后,及时进行冻存。

5 、单克隆抗体的大量制备 单克隆抗体的大量制备重要采用动物体内诱生法和体外培养法。

(1) 体内诱生法 Balb/c 小鼠,首先腹腔注射 0.5ml 液体石蜡或降植烷进行预处理。 1-2 周后,腹腔内接种杂交瘤细胞。杂交瘤细胞在小鼠腹腔内增殖,并产生和分泌单克隆抗体。约 1-2 周,可见小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水,即可获得大量单克隆抗体。

(2) 体外培养法 将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养。在培养过程中,杂交瘤细胞产生并分泌单克隆抗体,收集培养上清液,离心去除细胞及其碎片,即可获得所需要的单克隆抗体。但这种方法产生的抗体量有限。近年来,各种新型培养技术和装置不断出现,大大提高了抗体的生产量。

上海安研商贸有限公司作者

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