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荧光素标记拓普西异构酶Ⅰ抗体IgG,Anti-TPⅠ/FITC
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关 键 词 | 荧光素标记拓普西异构酶Ⅰ抗体IgG,Anti-TPⅠ/FITC,荧光素标记拓普西异构酶Ⅰ抗体IgG, |
- 【资料简介】
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荧光素标记拓普西异构酶Ⅰ抗体IgG,Anti-TPⅠ/FITC
荧光素如 FITC 分子可以通过半透膜,而蛋白质大分子不能透过,可将未与蛋白结合的荧光素透析除去。
( 1 )将标记完毕的荧光蛋白液装入一透析袋或玻璃纸袋内,液面稍留空隙,紧扎。
( 2 )浸入 0.02mol/pH
7.1 ~ 7.4 的 PBS 中(悬于大于标记物体积约 50 ~ 100 倍的 PBS 内),在 4 ℃ 中透析,每日更换 3 ~ 4 次 PBS ,约 5 ~ 7 天,透析液中无荧即可(在荧光光源照射下)。除游离荧光素可用 2×46cm 柱层析法,详细方法参阅第二章。加入荧光抗体 15 ~ 18ml (按床体积的 5% ~ 10% 加样),使其缓慢渗入柱内,待即将全部入柱时,加入 PBS 少许,关闭下口,停留 30 ~ 40min ,使游离荧光充分进入细筛孔中,然后再接通洗脱瓶开始滴入洗脱液。加入洗脱液一定量后,荧光抗体即向下移行,逐渐与存留于上端的游离荧光素之间拉开明显的界线,随着大量洗脱液的不断加入,二者分离距离越来越大,荧光抗体zui先流出,分前、中、后三部分收集,测 F/P 比值,合格者合并,浓缩,分装。洗脱液用 20% 磺基水杨酸测定蛋白(发生沉淀反应),继续洗脱,游离荧光素则相继被洗脱下来,至洗脱液中无蛋白和荧光素后,此层析柱即可再用。
若用以除去荧光抗体中的游离荧光素和硫酸铵等盐类,可先在过柱前透析一夜,否则, NH4+ 太浓,在蛋白未*洗脱时即出现 NH4+ ,因而影响提纯与回收蛋白,一般待洗脱液出现蛋白时,即进行收集,之后出现 SO4++ (用 1%BaCl2 检查发生白色沉淀)。zui后是 NH4+ ,(用纳氏 试剂检查呈黄棕色沉淀),待洗脱液无 SO4++ 及 NH4+ 后可再用。
如仅用小量荧光抗体,可用 1×20cm 的柱层析柱,取 2g Sephadex G-50 装柱,即可过滤 2 ~ 3.5ml 荧光抗体。Anti-TPⅠ/FITC 荧光素标记拓普西异构酶Ⅰ抗体IgG Anti-TRAF1/TNF-R1 /Biotin *化肿瘤坏死因子受体相关因子1抗体 Anti-TRAF1/TNF-R1 /FITC 荧光素标记肿瘤坏死因子受体相关因子1抗体IgG Anti-TRAF2/TNF-R2 /FITC 荧光素标记肿瘤坏死因子受体相关因子2抗体IgG Anti-TRAF3/CD40bp /FITC 荧光素标记CD40结合蛋白/CD40受体相关因子1抗体IgG Anti-TRAF6 /FITC 荧光素标记肿瘤坏死因子受体相关因子6抗体IgG Anti-TP-1/TEP1/FITC 荧光素标记端粒酶相关蛋白1抗体IgG Anti-TPⅡA/TOP2a/FITC 荧光素标记DNA拓普西异构酶ⅡA抗体IgG Anti-TRAIL/Apo2L /FITC 荧光素标记肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体/凋亡素2配体抗体IgG Anti-Transthyretin /FITC 荧光素标记转甲状腺素蛋白抗体IgG Anti-TRBF1 /FITC 荧光素标记端粒体复制结合因子1抗体IgG Anti-TRF/FITC 荧光素标记抗转铁蛋白抗体IgG Anti-TRF1/FITC 荧光素标记端粒结合蛋白1抗体IgG Anti-TRF2/FITC 荧光素标记端粒结合蛋白2抗体IgG Anti-TRH/FITC 荧光素标记促甲状腺素释放激素抗体IgG anti-rGST/HRP 辣根过氧化物酶标记重组*转移酶GST标签蛋白抗体IgG Anti-TRIM32/FITC 荧光素标记TRIM32抗体IgG Anti-TrK A/FITC 荧光素标记*激酶A抗体IgG Anti-TrK A.B.C/TrK /FITC 荧光素标记*激酶A.B.C抗体IgG Anti-Trk B/FITC 荧光素标记*激酶B抗体IgG
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