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牛牛天天人人综合影院 荧光素标记肿瘤坏死因子配体超家族成员18抗体IgG
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关 键 词 | 牛牛天天人人综合影院 荧光素标记肿瘤坏死因子配体超家族成员18抗体IgG,Anti-TNFSF18/GITR Ligand |
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牛牛天天人人综合影院 荧光素标记肿瘤坏死因子配体超家族成员18抗体IgG
Anti-TNFSF18/GITR Ligand/FITC 牛牛天天人人综合影院 荧光素标记肿瘤坏死因子配体超家族成员18抗体IgG Anti-TNF-α /HRP 辣根过氧化物酶标记肿瘤坏死因子抗体IgG Anti-CD34/Biotin *标记兔抗人、大、小鼠、猪、兔、狗CD34抗体IgG Anti-TOPOⅡα/DNA TPⅡα /FITC 荧光素标记DNA拓普西异构酶Ⅱ抗体IgG Anti-TNF-α /RBITC 红色荧光素标记肿瘤坏死因子抗体 Anti-TP53/FITC 荧光素标记抗肿瘤P53抗体IgG Anti-t-PA/FITC 荧光素标记组织型纤溶酶原激活剂抗体IgG Anti-TPH /FITC 荧光素标记*羟化酶抗体IgG Anti-TPO/FITC 荧光素标记兔抗甲状腺过氧化物酶抗体IgG Anti-TRA16/FITC 荧光素标记睾丸激素受体相关蛋白16抗体IgG Anti-TRA16 /FITC 荧光素标记睾丸激素受体相关蛋白/孤儿素受体相关蛋白抗体IgG Anti-TRADD/FITC 荧光素标记有死亡区的肿瘤坏死因子受体1相关蛋白抗体IgG Anti-TPⅠ/FITC 荧光素标记拓普西异构酶Ⅰ抗体IgG Anti-TRAF1/TNF-R1 /Biotin *化肿瘤坏死因子受体相关因子1抗体 Anti-TRAF1/TNF-R1 /FITC 荧光素标记肿瘤坏死因子受体相关因子1抗体IgG Anti-TRAF2/TNF-R2 /FITC 荧光素标记肿瘤坏死因子受体相关因子2抗体IgG Anti-TRAF3/CD40bp /FITC 荧光素标记CD40结合蛋白/CD40受体相关因子1抗体IgG Anti-TRAF6 /FITC 荧光素标记肿瘤坏死因子受体相关因子6抗体IgG “杂音”染色片
免疫组化除正常的真实的阳性信号外常常会遇到不正常的背景着色,这些非正常的着色称为“杂音”染色。“杂音”染色种类繁多,产生的原因也多种多样,为了便于说明,笔者将其归纳为下面几种。
1、 全片着色
全片着色是指整个切片全都染上了颜色,着色的强度可深可浅,总之,分不清那些组织是阳性那些组织是阴性。出现这种现象的原因有:
(1)、抗体浓度过高:一抗浓度过高是常见的原因之一。解决办法是,每次使用新抗体前应当对其工作浓度进行测试,使每一抗体个体化,找到适合自己实验室的理想工作浓度,既使是即用型的抗体也应如此,不能只简单的按说明书进行染色。
(2)、抗体孵育时间过长或温度较高:解决办法是,严格执行操作规程,随身佩带报时表或报时钟,及时提醒,避免因遗忘而造成时间延长。现在流行的二步法(Polymer)敏感性很高,要求一抗孵育的时间不是传统的1小时,而是30分钟,因此,要根据染色结果进行调整。
(3)、DAB变质和显色时间太长:DAB现用现配,如有沉渣应进行过滤后再用。配制好的DAB不应存放时间太长,因为在没有酶的情况下,过氧化氢也会游离出氧原子与DAB产生反应而降低DAB的效力,未用完的DAB存放在冰箱里几天后再用这种似乎节约的办法是不可取的。DAB的显色在显微镜下监控,达到理想的染色程度时立即终止反应。不过当染色片太多时或用染色机时,这样做似乎不现实,但至少应对一些新的或少用的抗体显色时进行监控,避免显色时间过长。
(4)、组织变干:修复液溢出后未及时补充液体、染色切片太多、动作太慢、忘记滴液、滴液流失等都是造成组织变干的原因。解决的办法是操作要认真仔细,采用DAKO笔或PAP Pen在组织周围画圈,可以有效的避免液体流失,也能提高操作速度。
(5)、切片在缓冲液或修复液中浸泡时间太长(大于24小时):原因上不清楚,但现象存在。有的实验室喜欢前一天将切片脱蜡至修复,第二天加抗体进行免疫组化染色,如果将装有切片和修复液的容器放在4ºC冰箱过夜,对结果无明显影响,如果放在室温,特别是炎热的夏天,会出现背景着色,因此,不可存放时间太长。(6)、一抗变质、质量差的多克隆抗体:注意抗体的有效期,过期的抗体要麽不显色要麽背景着色。用新买的抗体时设立阳性对照和用使用过的抗体作比较。
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