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男女呻吟久久免费视频 猴B病毒抗体(BV Ab)酶联免疫分析

2013年05月27日 09:37:47人气:202来源:上海科鉴生物科技有限公司

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关 键 词 猴B病毒抗体,BV Ab,猴,酶联免疫分析
【资料简介】

B 病毒抗体( BV Ab 酶联免疫 分析

试剂 盒使用说明书

本试剂盒仅供研究使用。

 96T

使用目的:

本试剂盒用于测定 猴血清、血浆及相关液体样本中 B病毒抗体( BV Ab )表达

实验原理

本试剂盒应用双 抗原 夹心法测定 标本 B 病毒抗体( BV Ab 表达 。用纯化的 B 病毒 抗原 包被微孔板,制成固相 抗原 可与样品中 B病毒抗体( BV Ab 相结合 经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后 再与HRP 标记的 B病毒 抗原 结合,形成 抗原 -抗体 - 酶标 抗原 复合物 ,经过*洗涤后 底物TMB 显色。 TMB HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。用酶标仪在 450 nm波长下测定吸光度( OD 值) ,与CUTOFF 值相比较,从而判定标本中猴 B 病毒抗体( BV Ab 的存在与否。

试剂盒组成

1

30倍浓缩洗涤液

20ml ×1

7

终止液

6ml× 1

2

酶标试剂

6ml× 1

8

阳性对照

0.5ml× 1

3

标包被

12孔× 8

9

阴性对照

0.5ml× 1

4

样品 稀释液

6ml× 1

10

说明书

1

5

显色剂A

6ml× 1

11

封板膜

2

6

显色剂B

6ml ×1/

12

密封袋

1

标本要求

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可 将标本放于 -20 ℃保存,但 避免反复冻融

2.不能检测含NaN3的样品 ,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的( HRP )活性。

操作步骤

1. 编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2 孔、 阳性对照2 孔、空白对照 1 孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)

2. 加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50 μl 。然后在 待测样品孔 先加样品稀释液40 μl ,然后再加待测样品10 μl 加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁, 轻轻 晃动 混匀,

3. 温育:用封板膜封板后置37 ℃温育3 0 分钟

4. 配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体, 甩干 ,每孔加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50 μ l,空白孔除外

7. 温育:操作同3

8. 洗涤:操作同5

9. 显色:每孔先加入显色剂A50 μ l,再加入显色剂 B50 μ l,轻轻震荡混匀, 37 ℃避光显色15分钟.

10. 终止:每孔加终止 50μl ,终止反应 (此时蓝色立转黄色)

11. 测定:以空白空调零, 4 50 nm波长依序测量各孔的 吸光 度(OD 值) 测定应在加终止液后15 分钟以内进行。

操作程序总结:

计算和结果判定:

 试验有效性:阳性对照孔平均值 1.00;阴性对照平均值 0.10

  临界值(CUT OFF )计算:临界值 = 阴性对照孔平均值+0.15

  阴性判定:样品OD <  临界值(CUT OFF )者为 B病毒抗体( BV Ab 阴性

  阳性判定:样品OD  临界值(CUT OFF )者为 B病毒抗体( BV Ab 阳性

注意事项

1.操作严格按照说明书进行,本试剂不同批号组分不得混用。

2.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

3 浓洗涤液 可能 会有 结晶 析出,稀释时可在水浴中加温助溶 ,洗涤时不影响结果。

4. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

5.底物请避光保存。

6.试验结果判定必须以酶标仪读数为准,使用双波长检测时,参考波长为 630nm

7.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为 2M 的硫酸,使用时必须注意安全。

保存条件及有效期

1 试剂盒保存: 2-8

2.有效期: 6 个月

上海科鉴生物科技有限公司作者

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