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女人天天干夜夜爽视频 大鼠胰岛素(Insulin)酶联免疫分析

2013年05月31日 10:12:00人气:169来源:上海科鉴生物科技有限公司

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关 键 词 大鼠胰岛素,大鼠,胰岛素,酶联免疫分析
【资料简介】

大鼠胰岛素(Insulin) 酶联免疫 分析

试剂 盒使用说明书

本试剂盒仅供研究使用。

检测范围:  96T

0  mU/L  -20  mU/L

使用目的:

本试剂盒用于测定 大鼠血清、血浆及相关液体样本中 胰岛素(Insulin) 含量

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定 标本 大鼠胰岛素(Insulin) 水平。用纯化的 大鼠胰岛素(Insulin) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 胰岛素(Insulin) 再与HRP 标记的 胰岛素(Insulin) 抗体结合,形成抗体- 抗原 - 酶标抗体复合物 ,经过*洗涤后 底物TMB 显色。 TMB HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的 胰岛素(Insulin) 呈正相关。用酶标仪在 450 nm波长下测定吸光度( OD 值), 通过标准曲线 计算样品 大鼠胰岛素(Insulin) 浓度。

试剂盒组成

1

30倍浓缩洗涤液

20ml ×1

7

终止液

6ml× 1

2

酶标试剂

6ml× 1

8

标准 品(40  mU/L

0.5ml× 1

3

标包被

12孔× 8

9

标准品 稀释液

1.5ml× 1

4

样品 稀释液

6ml× 1

10

说明书

1

5

显色剂A

6ml× 1

11

封板膜

2

6

显色剂B

6ml ×1/

12

密封袋

1

标本要求

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可 将标本放于 -20 ℃保存,但 避免反复冻融

2.不能检测含NaN3的样品 ,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的( HRP )活性。

操作步骤

1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

20  mU/L

5号标准品

150 μ l的原倍标准品加入 150 μ l标准品稀释液

10  mU/L

4号标准品

150 μ l 5 号标准品加入 150 μ l标准品稀释液

5  mU/L

3号标准品

150 μ l 4 号标准品加入 150 μ l标准品稀释液

2.5  mU/L

2号标准品

150 μ l 3 号标准品加入 150 μ l标准品稀释液

1.25  mU/L

1号标准品

150 μ l 2 号标准品加入 150 μ l标准品稀释液

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、 待测样品孔 。在酶标包被板上标准品准确加样50 μ l 待测样品孔中先加样品稀释液40 μ l,然后再加待测样品 10 μ l(样品zui终稀释度为 5 倍)。 加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁, 轻轻 晃动 混匀

3. 温育:用封板膜封板后置37 ℃温育3 0 分钟

4. 配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体, 甩干 ,每孔加满洗涤液,静置30 秒后弃去,如此重复 5 次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50 μ l,空白孔除外

7. 温育:操作同3

8. 洗涤:操作同5

9. 显色:每孔先加入显色剂A50 μ l,再加入显色剂 B50 μ l,轻轻震荡混匀, 37 ℃避光显色15分钟.

10. 终止:每孔加终止 50μl ,终止反应 (此时蓝色立转黄色)

11. 测定:以空白空调零, 4 50 nm波长依序测量各孔的 吸光 度(OD 值) 测定应在加终止液后15 分钟以内进行。

操作程序总结:

计算

以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的 OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以 稀释倍数 ;或用标准物的浓度与OD 值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的 OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以 稀释倍数 ,即为样品的实际浓度。

注意事项

1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。

2 浓洗涤液 可能 会有 结晶 析出,稀释时可在水浴中加温助溶 ,洗涤时不影响结果。

3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在 5 分钟内,如标本数量多,使用排枪加样。

4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值大于标准品孔*孔的 OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数( n 倍)后再测定,计算时请zui后 乘以 总稀释倍数( ×n×5 )。

5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物请避光保存。

7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准 .

8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9.本试剂不同批号组分不得混用。

10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。

保存条件及有效期

1 试剂盒保存: 2-8

2.有效期: 6 个月

上海科鉴生物科技有限公司作者

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