大鼠（Rat）*结合蛋白RBP

【资料简介】

大鼠（Rat）*结合蛋白RBP

本试剂盒仅供研究使用 标本：尿液

一、 试 剂 组 成

精密度微孔板96孔	（Microtitration Strips）	1 块	2 ～8℃干燥保存
酶标偶合液	（Conjugate ）	1 瓶 12.0毫升	2 ～8℃冷藏保存
标准品	（Standard）	5 瓶 各1.0毫升	2 ～8℃冷藏保存
呈色剂A	（Substrate A）	1 瓶 6.0毫升	2 ～8℃避光冷藏保存
呈色剂B	（Substrate B）	1 瓶 6.0毫升	2 ～8℃避光冷藏保存
终止液	（Stopping Solution）	1 瓶 6.0毫升	室温保存
20 倍浓缩洗涤液	（Rinsing Buffer x 20 ）	1 瓶 60.0毫升	2 ～8℃冷藏保存
5 倍浓缩样品稀释液	（Diluent x 5 ）	1 瓶 15.0ml	2 ～8℃冷藏保存
英文说明书，中文说明书		各一份	室温保存

二、注意事项

1. 此试剂为体外检测试剂，效期内使用，试剂应视为传染物，不同总批号的试剂不能混用。

2． 使用前应将盒内各试剂取出。室温放置至少30分钟，

3． 浓缩洗涤液出现结晶后，请于37℃孵育15分钟。

4． 浓缩样品稀释液出现结晶后，请于37℃孵育15分钟

5． 若24小时内进行实验，标本可存放于2～8℃。不需及时实验，标本-20℃保存，避免反复冻融。

6． 在反复清洗微孔板，并扣干微孔中的残余液体，否则将降低度，造成吸光度偏离的假像。

7． 加样完毕后，应注意轻微摇动微孔反应条，以便使孔中的液体充分混匀。

8． 试剂盒保存于2～8℃，请勿冷冻，有效期请见盒内标示。

三、实验前准备

1 ． 使用前应将盒内各试剂取出，室温放置至少30分钟。

2 ．准备各种实验仪器及材料，如微量移液器，吸头， 医用蒸馏水等

3 ． 浓缩洗液与医用蒸馏水1︰19倍稀释后成为应用洗涤液

4 ． 浓缩样品稀释液与医用蒸馏水1︰4倍稀释成应用样品稀释液

5 ．用应用样品稀释液来稀释样品，按照1：100的体积比来稀释样品如10μl的样品加入到1ml的应用样品稀释液中，充分混匀待用。）

四、操 作 步 骤

1 ．取出酶标板，设空白孔，依照次序对应分别加入 100μl 的标准品于空白微孔中（空白孔视为 0 号标准品，用 医用蒸馏水替代 ）

2 、分别标记样品编号，加入 100μl 的稀释样品于空白微孔中（不同的样本采用不同的吸头）。

3 、将酶标板置于 37 ℃ 温育 30 分钟；

4 、将酶标板板取出，将其中的液体甩去，每个孔中全部加满应用洗涤液后，立即甩去液体 ;

5 、每个孔中加满应用洗涤液后，轻微振摇酶标板 30 秒后将孔中的应用洗涤液甩去，在吸水纸上将酶标板拍干。

6 、重复第 5 个步骤 5 次，在吸水纸上将酶标板拍干。

7 、在标准品孔和样品孔中加入 100μl 的酶标偶合溶液。

8 、将 96 孔板置于 37 ℃ 温育 30 分钟。

9 、将酶标板取出，将其中的液体甩去，每个孔中全部加满应用洗涤液后，立即甩去液体。

10 、每个孔中再次加满洗涤应用液后，室温轻微振摇酶标板 30 秒后将孔中的应用洗涤液甩去，在吸水纸上将酶标板拍干。

11 、重复第 5 个步骤 5 次，在吸水纸上将酶标板拍干。

12 、在每个孔中加入底物 A 50μl 后立即加入底物 B 50μl 。轻轻振荡混匀。 （ A 液、 B 液采用不同的吸头加样）

13 、将酶标板置于 37 ℃ 避光温育反应 15 分钟。

14 、每个微孔中加入 50μl 的终止液，轻轻振荡混匀。

15 、在酶标仪上， 450nm 处测定 OD; 显色后， 15 分钟内进行测定。

16 、根据制备的标准曲线，计算样本含量

五、结 果 判 断

1. 仪器值：于波长 450nm 的酶标仪上读取各孔的 OD 值；

2 、检测值范围： 0 － 80nmol/ml

3 、敏感度： 0.5nmol/ml