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男女呻吟久久免费视频 人流行性出血热抗体(EHF-Ab)ELISA试剂盒使用方法

2014年06月04日 08:26:10人气:218来源:上海科兴商贸有限公司

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关 键 词 ELISA试剂盒
【资料简介】

 48T

使用目的:

本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中 流行性出血热抗体 (EHF-Ab) 表达

实验原理

本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中 人流行性出血热抗体 (EHF-Ab) 表达 。用纯化的 人流行性出血热抗原 包被微孔板,制成固相抗原,可与样品中 流行性出血热抗体 相结合 经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的 流行性出血热抗原 结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过*洗涤后加底物TMB显色。TMBHRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中 人流行性出血热抗体 (EHF-Ab) 的存在与否。

试剂盒组成

1

20倍浓缩洗涤液

20ml×1

7

终止液

3ml×1

2

酶标试剂

3ml×1

8

阳性对照

0.5ml×1

3

酶标包被板

12孔×4

9

阴性对照

0.5ml×1

4

样品稀释液

3ml×1

10

说明书

1

5

显色剂A

3ml×1

11

封板膜

2

6

显色剂B

3ml×1/

12

密封袋

1

标本要求

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可 将标本放于-20 保存,但 应避免反复冻融

2.不能检测含NaN3的样品 ,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

操作步骤

  1. 编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、 阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)

  1. 加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在 待测样品孔先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl 加样将
  2. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
  3. 样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
  4. 温育:用封板膜封板后置37 温育30分钟。
  5. 配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
  6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
  7. 温育:操作同3
  8. 洗涤:操作同5
  9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37 避光显色15分钟.
  10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

上海科兴商贸有限公司作者

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