女人天天干夜夜爽视频 豚鼠干扰素γ（IFN-γ）ELISA试剂盒说明书下载

【资料简介】

豚鼠 干扰素γ(IFN-γ) 酶联免疫 分析(ELISA) 试剂 盒

实验 目的：本试剂盒 仅供研究使用， 用于测定豚鼠血清，血浆及相关液体样本中干扰素γ(IFN-γ) 的含量。

实验原理 ：

应用双抗体夹心法测定 标本 中 豚鼠 干扰素γ(IFN-γ) 水平。用纯化的 豚鼠 干扰素γ(IFN-γ) 抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入 干扰素γ(IFN-γ)，再与HRP标记的 IFN-γ 抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物 ，经过*洗涤后 加 底物TMB显色。TMB在 HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的 干扰素γ(IFN-γ) 呈正相关。用酶标仪在 450 nm波长下测定吸光度（OD值）， 通过标准曲线 计算样品 中豚鼠 干扰素γ(IFN-γ) 浓度。

样本处理及要求 ：

1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可 将标本放于 -20 ℃保存，但 应 避免反复冻融 .

7. 不能检测含NaN3的样品 ，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤：

1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在*、第二孔中分别加标准品100 μ l，然后在*、第二孔中加标准品稀释液50 μ l，混匀；然后从*孔、第二孔中各取100 μ l分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50 μ l，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50 μ l弃掉，再各取50 μ l分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50 μ l分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50 μ l，混匀后从第七、第八孔中分别取50 μ l加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50 μ l，混匀后从第九第十孔中各取50 μ l弃掉。（稀释后各孔加样量都为50 μ l，浓度分别为48 ng/L ，32 ng/L  ，16 ng/L ，8 ng/L ，4 ng/L）。

2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、 待测样品孔 。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40 μ l，然后再加待测样品10 μ l（样品zui终稀释度为5倍）。 加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁， 轻轻 晃动 混匀 。

3. 温育：用封板膜封板后置37 ℃温育3 0 分钟 。

4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。

5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体， 甩干 ，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶标试剂50 μ l，空白孔除外 。

7. 温育：操作同3。

8. 洗涤：操作同5。

9. 显色：每孔先加入显色剂A50 μ l，再加入显色剂B50 μ l，轻轻震荡混匀，37 ℃避光显色15分钟.

10. 终止：每孔加终止 液50μl，终止反应 （此时蓝色立转黄色） 。

11. 测定：以空白空调零， 4 50 nm波长依序测量各孔的 吸光 度（OD值） 。测定应在加终止液后15分钟以内进行。

试剂盒性能：

1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。

2.批内与批见应分别小于9%和15%

检测范围：

2 ng/L  -50 ng/L

保存条件及有效期：

1.试剂盒保存： 2-8 ℃

2．有效期：6个月

应用：仅供科学实验研究使用，具体产品信息请来电或在线方式咨询。

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