女人天天干夜夜爽视频 大鼠磷酸化AKT蛋白（P-AKT）ELISA试剂盒

【资料简介】

大鼠磷酸化AKT蛋白(P-AKT)酶联免疫分析(ELISA)

试剂盒使用说明书

l 本试剂盒仅供科研使用。

l 本试剂盒用于体外定量检测大鼠血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中大鼠磷酸化AKT蛋白(P-AKT)的含量。

l 有效期：6个月

l 保存条件： 2-8 ℃

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠磷酸化AKT蛋白(P-AKT)水平。用纯化的大鼠磷酸化AKT蛋白(P-AKT)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入大鼠磷酸化AKT蛋白(P-AKT),再与HRP标记的大鼠磷酸化AKT蛋白(P-AKT)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠磷酸化AKT蛋白(P-AKT)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠磷酸化AKT蛋白(P-AKT)浓度。

试剂盒组成

试剂盒组成	48 孔配置	96 孔配置	保存
说明书	1 份	1 份	R.T.
封板膜	2 片（ 48 ）	2 片（ 96 ）	R.T.
密封袋	1 个	1 个	R.T.
酶标包被板	1×48	1×96	2-8 ℃ 保存
标准品：180 pg/ml	0.5ml×1 瓶	0.5ml×1 瓶	2-8 ℃ 保存
标准品稀释液	1.5ml×1 瓶	1.5ml×1 瓶	2-8 ℃ 保存
酶标试剂	3 ml×1 瓶	6 ml×1 瓶	2-8 ℃ 保存
样品稀释液	3 ml×1 瓶	6 ml×1 瓶	2-8 ℃ 保存
显色剂A液	3 ml×1 瓶	6 ml×1 瓶	2-8 ℃ 保存
显色剂B液	3 ml×1 瓶	6 ml×1 瓶	2-8 ℃ 保存
终止液	3ml×1 瓶	6ml×1 瓶	2-8 ℃ 保存
浓缩洗涤液	（ 20ml×20 倍） ×1 瓶	（ 20ml×30 倍） ×1 瓶	2-8 ℃ 保存

样本处理及要求

1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。

4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可 将标本放于 -20 ℃保存，但 应避免反复冻融.

7. 不能检测含NaN3的样品 ，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。