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女人天天干夜夜爽视频 ELISA检测试剂盒洗板不畅
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- 【资料简介】
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在ELISA检测试剂盒操作中,洗涤是zui主要的关键技术,操作时尤为注意:
保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板後在吸水纸或毛巾(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干(若使用易掉渣的纸,纸屑会留在板孔中,由于纸屑中含有氧化剂而造成高值阴性。);
注意各种试剂盒的洗液不要混用。如果洗液需要稀释,应按要求稀释,所用的水电导率在1.5us/cm 之下,洗液如果结晶应待其融解後配制。
保证洗板浸泡时间为40 秒左右,孔内液体被洗板机吸收得越干净洗涤效果更好,手工洗板防止洗液在孔内形成气泡。
合理安排,或多用几台洗板机。
在间接法中如本底较高,可增加洗涤次数或延长浸泡时间。
参考ELISA检测试剂盒洗涤
显 色:
结果不好的可能原因
显色剂配制後放置时间过长或使用过期显色剂;
加显色剂时溅出孔外造成液体回流。
解决方法:
显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用;
加样时保持显色剂不外流,且加样量要准确,顺序不能颠倒。
A、B液应避免接触金属器械。
可以参考ELISA#显色和比色
终 止:
结果不好的可能原因:
加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。 解决办法:
熟悉加样器的使用,在进行实验之前用水来练习加样的快速和准确;
试验前标本需缓慢升温至室温,若标本为血清,冻结血清融解後,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀并避免产生气泡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清後再检测;
加样时应将所加物加在ELISA 板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出;
加样後及时放入孵箱;
加酶试剂後用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干;
如果采用AT或其他全自动加样,选择FAME或其他後处理仪器加酶试剂;
标本较多时,请分批操作。每次加样在两到三分钟内完成。加标本时三排一加。每次加完样进行计时;
参考ELISA检测试剂盒加样
温 育:
不好的操作原因:
温育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
温育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。
解决办法:
贴封片或加盖:为避免蒸发,板上应加盖,也可用塑料贴封纸或保鲜膜复盖板孔,反应板不宜叠放,以保证各板的温度都能迅速平衡。
按说明步骤严格控制操作时间。
建议采用空气浴进行温育。
参考ELISA实验操作中的温育(incubation)
洗 板:
结果不好的可能原因
采用手工洗板,ELISA检测试剂盒孔与孔之间液体交叉。
采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不*;洗板针堵塞,抽吸不*;导致洗板效果差。
反应板过多造成洗板等待时间长。
在间接法中如本底较高。
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