男女呻吟久久免费视频 人前列腺素F（PGF）英文说明书

【资料简介】

Human  Prostaglandin F （ PGF ）

人前列腺素F(PGF)英文说明书

FOR RESEARCH  USE ONLY

Assay range ： 8ng/L  -  240ng/L 96 determinations

Purpose

This kit allows for the determination of PGF concentrations  in Human serum, cell culture supernates  and other  biological fluids

Principle of the assay

T he kit  assay Human PGF level in the sample , use Purified Human PGF antibody to coat microtiter plate wells , make solid-phase antibody,  then  add PGF to wells , Combined PGF  antibody which With HRP labeled , become antibody - antigen - enzyme-antibody complex, after washing Compley, Add TMB substrate solution,TMB substrate becomes blue color At HRP enzyme-catalyzed, reaction is terminated by the addition of a sulphuric acid solution and the color change is measured spectrophotometrically at a wavelength of 450 nm.  The concentration of Human PGF in the samples is then determined by comparing the O.D. of the samples to the standard curve .

Materials provided with the k it

1	wash  solution	2 0ml×1bottle	7	Stop Solution	6 ml×1 bottle
2	HRP-Conjugate reagent	6 ml×1 bottle	8	Standard（ 480ng/L ）	0.5ml×1 bottle
3	Microelisa stripplate	12well× 8 strips	9	Standard diluent	1.5 ml×1bottle
4	Sample diluent	6 ml×1 bottle	10	Instruction	1
5	Chromogen Solution A	6 ml×1 bottle	11	Closure plate membrane	2
6	Chromogen Solution B	6 ml×1 bottle	12	Sealed bags	1

Specimen requirements

• extract as soon as possible after Specimen collection, and according to the relevant literature, and should be experiment as soon as possible after the extraction. If it can ’ t,  specimen can be kept in -20 ℃  to preserve, Avoid repeated freeze-thaw cycles .
• Can’t detect the sample which contain NaN3, because  NaN3 inhibits HRP active.

Assay procedure

• Dilute and add sample : Dilute  Original density Standard  as follow table:

240ng/L	5  Standard	150 μ l  Original density Standard +150 μ l  Standard diluent
120ng/L	4  Standard	150 μ l 5 Standard +150 μ l  Standard diluent
60ng/L	3  Standard	150 μ l 4  Standard +150 μ l  Standard diluent
30ng/L	2  Standard	150 μ l 3 Standard  +150 μ l  Standard diluent
15ng/L	1  Standard	150 μ l 2 Standard  +150 μ l  Standard diluent

2. A dd sample : Set blank wells separay (blank comparison wells don’t add sample and HRP-Conjugate reagent , other each step operation is same). testing sample well. add Sample dilution 40μl to testing sample well , then add testing sample 10μl ( sample final dilut ion  is 5 -fold ),  add sample to well s  ,  don’t touch the well wall as far as possible, and Gently mix.

3. Incubate : After closing plate with Closure plate membrane , incubate for 30 min at 37 ℃ .

4. Configurate liquid: 30-fold(or 2 0-fold)  wash solution  diluted  30-fold (or 2 0-fold)  with distilled water and reserve.

5. W ashing : Uncover Closure plate membrane, discard Liquid, dry by swing, add washing buffer to every well, still for 30s then drain, repeat 5 times, dry by pat.

6. A dd enzyme : Add  HRP-Conjugate reagent 50μl to each well, except  blank well.

7. I ncubate : Operation with 3.

8. W ashing : Operation with 5.

9. C olor : Add  Chromogen Solution A  50ul and  Chromogen Solution B 50ul to each well,  evade the light preservation  for 1 0  min at 37 ℃

10. Stop the reaction : Add Stop Solution 50μl  to each well, Stop the reaction(the blue color change to yellow color).

11. A ssay : take blank well as zero ,  Read absorbance at 450nm after Adding Stop Solution and within 15min.

S teps  description

Standar d,  Sample diluent

A dd Standar d,  Sample diluent ,  incubate for 30 min at 37 ℃ .

W ash 5 time, A dd HRP-Conjugate reagent ,  incubate for 30 min at 37 ℃ .

W ash 5 times, A dd  Chromogen Solution A  and B,  incubate for 1 0 min at 37 ℃ .

A dd Stop Solution

Read absorbance at 450nm within 15 min

calculate

Calculate

Take the standard density as the horizontal , the OD value for the vertical  ,draw the standard curve on graph paper,  Find out the corresponding density according to the sample OD value by the Sample curve, multiplied by the dilution multiple, or calculate the straight line regression equation of the standard curve with the standard density and the OD value ,with the sample OD value in the equation, calculate the sample density, multiplied by the dilution factor , the result is the sample actual density.

Important notes

• The kit takes out from the refrigeration environment should be balanced 15-30 minutes in the room temperature,  ELISA plates coated if has not use up after opened, the plate should be stored in Sealed bag.
• washing buffer will Crystallization separation, it can be heated the water helps dissolve when dilute . Washing does not affect the result.
• add Sample with sampler Each step, And proofread its accuracy frequently, avoids the experimental error. add sample within 5 min, if the number of sample is much , recommend to use Volley .
• if the testing material content is excessively high er  (The sample OD is bigger than the first standard well ),please dilute Sample (n -fold ), Please diluent e and  multiplied by the dilution factor . （×n×5）.
• Closure plate membrane  only limits the disposable use, to avoid cross-contamination .
• The substrate evade the light preservation .
• Please according to use instruction strictly, The test result determination must take the  microtiter plate reader  as a standard.
• All samples, washing buffer and each kind of reject should according to infective material process.
• Do not mix reagents with those from other lots .

Storage and validity

1．Storage：  2-8 ℃ .

2．validity： six months