牛牛天天人人综合影院 微生物液体培养实验

【资料简介】

过培养法
实验方法原理


实验材料    细菌
试剂、试剂盒    胰化蛋白胨酵母提取物氯化钠NaOH
仪器、耗材    接种针培养瓶摇床
实验步骤
1.  取5 ml 液体培养基加入一支无菌的16 mm 或18 mm 的培养试管中。

2.  用接种环挑一个单菌落，浸没于培养液中并轻轻振动接种环，使待接种的细菌分散在培养液中。

3.  盖好试管，在摇床或转鼓式培养装置上以60 r/min 速度。

4.  于37 ℃培养至饱和（约6 h）新鲜培养至饱和期的培养液细菌浓度大约为1X109~2X109细胞/ml。

大体积培养法

实验材料    细菌
试剂、试剂盒    胰化蛋白胨酵母提取物氯化钠NaOH
仪器、耗材    接种针培养瓶摇床
实验步骤
1.  按1：100的比例将过培养物加入到一个无菌烧瓶中，烧瓶的体积应该是培养液体积的5倍以上。

2.  于37℃，约300 r/min 剧烈揺动培养。
注意事项
1.  如果不揺动培养细胞，所用烧瓶的体积应比培养液体积大20倍以上。

细菌培养的检测

实验材料    细菌
仪器、耗材    显微镜玻片盖玻片滴管
实验步骤
一、利用计数板检测

1.  用一片干净的盖玻片盖住一片干净的计数玻片或者petraff-Hausser小室，参见下面。

2.  用含少量培养液的吸管接触盖玻片的边缘。

3.  在相差显微镜400倍下观察，并且按一个小方块中所见的每个细菌大约相当于2×107细胞/ml，计算浓度。

二、利用分光光度计检测

1.  稀释培养液至OD600＜1。

2.  按每0.1OD值大约相当于108细胞/ml计算细菌浓度。