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男女呻吟久久免费视频 进口人血小板活化因子(PAF)试剂盒操作说明书

2015年12月09日 15:59:29人气:804来源:上海劲马实验设备有限公司

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关 键 词 PAF试剂盒,进口人血小板活化因子(PAF)试剂盒,R&D PAF试剂盒,RD PAF试剂盒
【资料简介】

人血小板活化因子( P AF 酶联免疫分析

试剂盒使用说明书

本试剂盒仅供研究使用。

检测范围: 96 T

0.6ng/L - 20ng/L

使用目的: 本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中血小板活化因子(PAF)含量。

实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人血小板活化因子(PAF 水平。用纯化的人血

小板活化因子(PAF 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入血小 板活化因子(PAF ,再与 HRP 记的血小板活化因子(PAF)抗体结合,形成抗体-抗原- 酶标抗体复合物,经过*洗涤后加底物 TMB 显色。TMB HRP 酶的催化下转化成蓝色, 并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的血小板活化因子(PAF 呈正相 关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人血小板活 化因子(PAF)浓度。

试剂盒组成

1

30 浓缩洗涤液

20ml×1

7

终止液

6ml×1

2

酶标试剂

6ml×1

8

标准品(40ng/L

0.5ml×1

3

酶标包被板

12 ×8

9

标准品稀释液

1.5ml×1

4

样品稀释液

6ml×1

10

说明书

1

5

显色剂 A

6ml×1

11

封板膜

2

6

显色剂 B

6ml×1/

12

密封袋

1

标本要求

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能 马上进行试验,可将标本放于-20 存,但应避免反复冻融

2 .不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 制辣根过氧化物酶的(HRP 活性。 操作步骤

1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀 释。

20ng/L

5 号标准品

150µl 原倍标准品加入 150µl 标准品稀释液

10ng/L

4 号标准品

150µl 5 标准品加入 150µl 标准品稀释液

5ng/L

3 号标准品

150µl 4 标准品加入 150µl 标准品稀释液

2.5ng/L

2 号标准品

150µl 3 标准品加入 150µl 标准品稀释液

1.25ng/L

1 号标准品

150µl 2 标准品加入 150µl 标准品稀释液

2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、

待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50µl 测样品孔中先加样品稀释液 40µl, 然后再加待测样品 10µl 样品zui终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽 量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3. 温育:用封板膜封板后置 37 育 30 钟。

4. 配液:将 30 浓缩洗涤液用蒸馏水 30 稀释后备用

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 后弃去,如此 重复 5 次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50µl,空白孔除外。

7. 温育:操作同 3

8. 洗涤:操作同 5

9. 显色:每孔先加入显色剂 A50µl,再加入显色剂 B50µl,轻轻震荡混匀,37 避光显色

15 .

10.终止:每孔加终止液 50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11.测定:以空白空调零,450nm 波长依序测量各孔的吸光度(OD 。 测定应在加终止 液后 15 钟以内进行。

操作程序总结:

计算

以标准物的浓度为横坐 OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲 线 ,根据样

OD 由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与 OD 计算出标

准曲线的直线回归方程式,将样品的 OD 值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数, 即为样品的实际浓度。

注意事项

1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 钟后方可使用,酶标包被板开封后如未 用完,板条应装入密封袋中保存。

2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。

3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间 控制在 5 钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本 OD 值 大于标准品孔*孔的 OD 先用样品稀释液稀释一定倍数(n 倍)后再测定,计 算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5)。

5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物请避光保存。

7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9.本试剂不同批号组分不得混用。

10. 与英文说明书有异,以英文说明书为准。 保存条件及有效期

1.试剂盒保存:;2-8

2.有效期:6 个月

上海劲马实验设备有限公司作者

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