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女人天天干夜夜爽视频 β内酰胺酶(β-lactamase)酶联免疫试剂盒使用方法
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关 键 词 | β-lactamase试剂盒 |
- 【资料简介】
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检测范围: 96T
5U/L - 150U/L
使用目的:
本试剂盒用于测定牛奶样本中β内酰胺酶 ( β -lactamase) 含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中 β内酰胺酶 ( β -lactamase) 水平。用纯化的β内酰
胺酶 ( β -lactamase) 抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入β内酰胺
酶 ( β -lactamase) ,再与 HRP 标记的β内酰胺酶 ( β -lactamase) 抗体结合,形成抗体 - 抗原 - 酶标
抗体复合物,经过*洗涤后加底物 TMB 显色。 TMB 在 HRP 酶的催化下转化成蓝色,并
在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的β内酰胺酶 ( β -lactamase) 呈正相
关。用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度( OD 值),通过标准曲线计算样品中β内酰胺酶 ( β
-lactamase) 浓度。
试剂盒组成
1 30 倍浓缩洗涤液 20ml × 1 瓶 7 终止液 6ml × 1 瓶
2 酶标试剂 6ml × 1 瓶 8 标准品( 240U/L ) 0.5ml × 1 瓶
3 酶标包被板 12 孔× 8 条 9 标准品稀释液 1.5ml × 1 瓶
4 样品稀释液 6ml × 1 瓶 10 说明书 1 份
5 显色剂 A 液 6ml × 1 瓶 11 封板膜 2 张
6 显色剂 B 液 6ml × 1/ 瓶 12 密封袋 1 个
标本要求
1 .标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验,可将标本放于 -20 ℃保存,但应避免反复冻融
2 .不能检测含 NaN3 的样品,因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的( HRP )活性。
操作步骤
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。
120U/L 5 号标准品 150μl 的原倍标准品加入 150μl 标准品稀释液
60U/L 4 号标准品 150μl 的 5 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
30U/L 3 号标准品 150μl 的 4 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
15U/L 2 号标准品 150μl 的 3 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
7.5U/L 1 号标准品 150μl 的 2 号标准品加入 150μl 标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50μl ,待测样品孔中先加样品稀释液 40μl ,
然后再加待测样品 10μl (样品zui终稀释度为 5 倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽
量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置 37 ℃温育 3 0 分钟。
4. 配液:将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此
重复 5 次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂 50μl ,空白孔除外。
7. 温育:操作同 3 。
8. 洗涤:操作同 5 。
9. 显色:每孔先加入显色剂 A50μl ,再加入显色剂 B50μl ,轻轻震荡混匀, 37 ℃避光显色
15 分钟 .
10. 终止:每孔加终止液 50μl ,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零, 450nm 波长依序测量各孔的吸光度( OD 值)。 测定应在加终止
液后 15 分钟以内进行。
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