牛牛天天人人综合影院 SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒说明书

【资料简介】

For Research Use Only

仅供研究用

EnoGene™ SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒

（ EnoGene™ SDS-PAGE Gel Preparation Kit ）

LOT:QY-AB1140

SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒

一、产品介绍

SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒提供了配制  SDS-PAGE 凝胶所需的各种试剂，用户只需自备制胶器具和蒸馏水，即可配制

PAGE 胶了。 SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒不仅可用于配制  SDS-PAGE 凝胶，也可用于配制非变性 (native)PAGE 凝胶。本试剂盒约可配制 10-50  块常规大小的 PAGE  胶 ( 即聚丙烯酰胺凝胶 ) 。

二、试剂盒组份

组	份	E1WP302	储存
30% Acr-Bis （ 29 ： 1 ）		100 mL	4 ℃
1M Tris-HCl, pH8.8		100 mL	4 ℃
1M Tris-HCl, pH6.8		25 mL	4 ℃
10% SDS		5mL	4 ℃
Ammonium Persulfate( 过硫酸铵 )		1g	4 ℃
TEMED		0.5mL	4 ℃

三、试剂盒以外自备仪器和试剂

可调移液器、垂直板电泳仪、双蒸水

SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒 四、操作步骤

1 、 根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度，再按照下面的表格配制 SDS-PAGE 的分离胶 ( 即下层胶 ) ：不同浓度的 SDS-PAGE 分离胶的分离范围：

SDS-PAGE 分离胶浓度	分离范围
6% 胶	50-150kD
8% 胶	30-90kD
10% 胶	20-80kD
12% 胶	12-60kD
15% 胶	20kD 以下

2 、按照下面的配方进行配制（ 总体积为 15ml ），如有体积变动可按比例进行放大或缩小。过硫酸铵配制成 10% 溶液后（ 0.5g 中加入 4.5ml 蒸馏水溶解），分装成小管 -20 ℃保存，通常半年内有效。

注：如果配制非变性胶，参考上述配方，不加 10%SDS 即可配制成非变性 PAGE 胶。

贮液（ ml ）	分离胶中丙烯酰胺的终浓度（ % ）
	6	8	10	12	15
蒸馏水	6.0	5.0	4.0	3.0	1.5
30% Acr-Bis （ 29 ： 1 ）	3.0	4.0	5.0	6.0	7.5
1M Tris-HCl, pH8.8	5.7	5.7	5.7	5.7	5.7
10% SDS	0.15	0.15	0.15	0.15	0.15
10% 的过硫酸铵	0.15	0.15	0.15	0.15	0.15
TEMED	0.01	0.01	0.01	0.01	0.01

For Research Use Only

仅供研究用

3 、 按照如下表格配制 SDS-PAGE 的浓缩胶 ( 也称堆积胶、积层胶或上层胶 ) ：

成分	配制不同体积 SDS-PAGE  浓缩胶所需各成分的体积 ( 毫升 )
5% 胶	2	3	4	6	8	10
蒸馏水	1.4	2.1	2.7	4.1	5.5	6.8
30% Acr-Bis （ 29 ： 1 ）	0.33	0.5	0.67	1.0	1.3	1.7
1M Tris-HCl, pH6.8	0.25	0.38	0.5	0.75	1.0	1.25
10% SDS	0.02	0.03	0.04	0.06	0.08	0.1
10% 的过硫酸铵	0.02	0.03	0.04	0.06	0.08	0.1
TEMED	0.002	0.003	0.004	0.006	0.008	0.01

五、注意事项：

1 、所过硫酸铵配制成 10% 溶液后，应当 -20 ℃保存。同时应尽量减少室温存放时间，以防失效。

2 、  TEMED 宜避光保存。另外凝胶凝聚的速度和温度及光照关系密切，可通过适当调节 TEMED 的用量，控制在不同的室

内环境下凝胶凝聚的速度。

3 、请穿实验服并戴一次性手套操作。

4 、

六、保存条件：

1M Tris-HCl, pH8.8 、 10% SDS 、 Ammonnium persulfate ( 过硫酸铵 ) 粉末和 1M Tris-HCl, pH6.8 室温或 4 ℃保存。 30% Acr-Bis (29:1) 和 TEMED 4 ℃避光保存。

过硫酸铵配制成 10% 溶液后（ 0.5g 中加入 4.5ml 蒸馏水溶解， 1g 中 9ml 蒸馏水溶解），分装成小管 -20 ℃保存，通常半年内有效。