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挑选科研ELISA试剂盒请依据样品中检测物水平

时间:2017-10-25阅读:884
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ELISA试剂盒如果试验君的试验样品为人、小鼠或大鼠样品,那么要挑选一个合适的试剂盒相对简单,但如果您的试验样品来历于其他物种如鸡、牛、猴等,则市面上能提供的试剂盒品种却很少。且不可轻信能提供近万种试剂盒,掩盖多物种的供货商。但如果又非要检测这些物种的目标时,要对待检物(如有种属差异性)进行同源性剖析以及试剂盒的种属穿插反响数据。关于样品类型而言,一般的商业化试剂盒都通过血清、血浆和细胞培养上清液的验证。在挑选试剂盒时,要具体阅览说明书,比方血浆样本抗凝剂的运用是否与试剂盒兼容。另外,在某些景象下样品中会存在干扰要素比方溶血血浆、高脂肪含量的样品、人抗鼠抗体(HAMA)、细胞培养上清中含胎牛血清等。因而需依据样品来挑选试剂盒,必要时还要依据样正本恰当优化。或在样品搜集前,先阅览一些牢靠供货商试剂盒的说明书或直接咨询。如果您的样品为安排或细胞裂解物,则需求更慎重的挑选试剂盒。市面上大多数的商业化试剂盒没有通过多种来历安排样本的验证。这需求试验君能了解不是一切试剂盒所用的抗体对,都能特异的从一堆裂解物蛋白中特异检出您的意图蛋白,还要考虑安排样品的基质效应(Matrix Effect)等。但如果试验君要了解安排样品的制备问题,我们另起一文来总结。
依据样品中检测物水平来挑选科研ELISA试剂盒
如果试验君关于样品中待检物的水平没有任何可参阅的数据,挑选宽动力学检测规模的试剂盒。如果样品中待检物的含量很低,主张挑选高灵敏度的试剂盒。为了下降基质效应,有必要用稀释液至少做2倍稀释。如果样品中待检物含量远超过试剂盒的检测规模(标曲规模), 也需做恰当的倍数稀释。在zui终计算结果时,需乘以相应的稀释倍数。
依据样本可获得性来挑选科研ELISA试剂盒
一般而言,商业化试剂盒的样品用量都在50ul或100ul, 但也有一些供货商的试剂盒对样品的用量要求可少至10ul。如果您的样品很宝贵或较难获取,则需求仔细考虑试剂盒对样品用量的要求。如果样品量少,且要做多因子检测时更需慎重。
细致比较科研ELISA试剂盒要害性技术参数
ELISA试剂盒的要害技术参数包括板内差异性、板间差异性、批间差异性、重复性、特异性及穿插反响性、回收率等。如果试验君常常展开ELISA试验,主张运用同一厂家的试剂盒,这样可尽量确保数据的重复性(当然条件是试验条件的一致性)。关于科研用的定量ELISA试剂盒,不同的生产厂家运用的抗体对、酶以及底物、生产工艺和研发实力不尽相同,自然不同厂家试剂盒测出的数据会有差异。 

 

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