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ELISA试剂盒试验样本前期准备工作操作过程

时间:2017-10-20阅读:1009
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我司ELISA试剂盒产品炽热*,*,质量保证,产品买的多扣头就多,另有礼品赠送。我司主营现货产品有ELISA试剂盒、抗体、培养基、染色液、血清、细胞株、规范品等,订货!
试验前样本和试剂盒室温平行1小时,如果样本是冻存样本,应提早拿到2-8摄氏度进行冻结(不建议直接室温冻结)
准备好试验所需耗材,蒸馏水(去离子水)。
ELISA试剂盒操作流程描叙:
1.即将进行试验的版孔进行设定好,规范品5个点,每个点设定平行,需求用到10个孔,空白只需1个孔。剩下孔能够做为样本孔
2.稀释规范,准备好5个EP管,然后在每个EP管中参加150微升规范稀释液,编上编码,分别为1,2,3,4,5,在1号管中参加150规范品,用枪头重复吹打10次左右(留意操控起伏不要过大简单发生气泡)如果有涡旋仪能够在涡旋仪上涡旋5秒左右,然后换枪头,在1号管中取150微升参加到2号管,后面进程一次类推。zui终稀释完,前面4个管中每管液体在150微升,5号管为300微升。浓度是从大到小。
3.规范、样本、空白加样:规范是每个浓度点2个孔(做平行),每孔参加50微升,加样进程中留意换枪头,样本孔中每孔参加50微升,加样进程中留意换枪头,空白孔参加50微升蒸馏水。特别要阐明的是,规范加样和样本加样尽量操控在15分钟内加完,如果时刻拖的太长,会导致前面孔先反响后面孔才开端反响,这样数值误差过大。加完样后盖上封板膜,至37摄氏度孵育30分钟.
4.洗版,在孵育进程中能够将洗涤液配好,20ml30倍浓缩洗涤液用蒸馏水或许去离子水定容到600ml即可。每孔参加250-300微升的洗涤液(不要漫过版孔),(如果有震动仪的话,能够讲板子放入震动仪上5秒左右,然后静止三十秒,没有请疏忽次进程)将板子在桌子上晃动5秒左右,然后静置30秒,甩干,决定。阐明:甩干进程尽量要快,1秒内就能够完结,不要渐渐歪斜倒掉液体,直接翻板甩掉液体即可。决定进程需求在桌子上垫一层吸水纸或许滤纸,版孔朝下拍几下,拍干差异主要看吸水纸和滤纸上没有显着的水渍为完结。
5.每孔参加50微升的酶标试剂,此处在空白孔中不需求加(空白孔为空),孵育30分钟。
6.洗版同进程4
7.显色,先每孔中参加50微升的显色A液,然后每孔中参加50微升显色B液。避光37摄氏度显色15分钟
8.停止,每孔参加50微升的停止液,留意,加完停止液必须在15分钟内读数,超越时刻读数无效。在规则时刻内读数都是有用的。
至此,整个试验完毕
需求额外提示的是:在做完整个试验过仪器之前,仪器预热半小时,这个计算好时刻,也能够直接将仪器一向开着,直到整个试验完毕。
ELISA试剂盒在加液进程中不要使枪头触及到板子底部,一般枪头都悬空,能够将枪头靠在孔边缘,但枪头尖悬空,如果枪头上残留液体看全体多少数,不要吹打下去。特别忌讳在版孔内壁流向版孔。整个加液进程不要发生气泡。(洗涤液在外)

 

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