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抗病毒活性试验是将病毒分别接种在试样和对照样上,在特定的接触时间后,计数剩余的感染性病毒数量(病毒感染滴度),以抗病毒试样和对照样试样中剩余感染性病毒的平均对数值的差值作为病毒减少值,或以抗病毒试样和对照样试样中剩余感染性病毒数量的平均值来计算病毒减少率。病毒感染滴度采用噬斑法或TCID50法测定。
抗病毒活性试验-国家检验检测中心
抗病毒活性试验步骤
1、试样准备
所有试样均置于带盖样品瓶中备用。
如果将培养皿试验条件下放入培养箱时,能保持湿度稳定(通过在每个培养皿上盖上盖子),则可在无菌培养皿中制备试样。在进行试验之前,无菌地将试样转移至无菌瓶中。
2、试样接种病毒
对于吸水性试样,用微量移液器精准吸取0.2mL病毒悬液多点接种至样品瓶中的试样上,然后用瓶盖密封样品瓶。
对于疏水性织物试样,用微量移液器精准吸取 0.2mL病毒悬液多点接种至50mmX50 mm的试样上,再用另一块50mmX50mm的样片覆盖,使试样抗病毒处理面与病毒悬液充分接触。对于疏水性纤维或纱线试样,用微量移液器精准吸取0.2mL病毒悬液多点接种至50mmX50mm的试样上,再用50mmX50mm的不影响病毒活性的塑料薄膜覆盖,使试样与病毒悬液充分接触。
3、接触时间
将样品瓶放入培养箱,在25℃条件下培养2h。经相关方协商确定后可调整接触时间,但不超过24h,并在试验报告中注明。
4、接种后立即洗脱病毒
3个对照样试样接种病毒后,立即在样品瓶中加入20mL的SCDLP液体培养基,然后将样品瓶盖上瓶盖,用旋涡混合器振荡5次,每次5s,将病毒从试样中洗脱下来。
注:该病毒悬液将作为对照试样的初始洗脱病毒悬液。
5、接触时间后洗脱病毒
3个对照样试样和3个抗病毒试样接触2h后,在样品瓶中加入20ml的SCDIP液体培养基,然后盖上瓶盖,用旋涡混合器振荡5次,每次5s,将病毒从试样中洗脱下来。
注:这些病毒悬液是与对照样试样和抗病毒试样经接触时间后的初始洗脱病毒悬液。
抗病毒活性试验-国家检验检测中心
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