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固氮酶活性检测—乙炔还原法

时间:2024-8-19阅读:67
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生物固氮是自然生态系统利用氮素的主要途径,固氮微生物利用体内固氮酶,通过生物固氮作用(自生固氮、共生固氮或联合固氮的形式)将大气中的分子氮(N2)转化成氨(NH3),参与氮素循环。

01固氮酶的检测原理

固氮酶一般指钼铁固氮酶,即铁蛋白(nifH编码)和钼铁蛋白(nifDK编码)构成的双组分蛋白酶;铁蛋白负责传递电子给钼铁蛋白,N2和其他底物的结合还原在钼铁蛋白进行。

乙炔还原法的检测原理是基于固氮酶的还原性,即指它可将与N2结构相似的乙炔(C2H2)还原为乙烯(C2H4)。由此,C2H2可以被用作N2的替代底物,通过测定C2H4生成量来推算出固氮酶活性。

02固氮酶的应用方向

固氮酶的应用范围广泛,在农业生产、生态保护、环境修复、科学研究和合成生物学等领域展现出巨大潜力。例如,固氮酶可以用于优化施肥管理;评估土壤固氮能力;筛选和鉴定高固氮能力的菌株;研究品种选育和菌株固氮改良潜力;评估环境污染修复状况等。


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