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8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)检测|茁彩生物

时间:2025-5-27阅读:14
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8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG),作为DNA氧化损伤的重要标志物,不仅反映了机体的氧化应激水平,还与多种疾病的发生发展密切相关。

它不仅是细胞内氧化应激状态的敏感指标,还与众多疾病的发生发展密切相关,其研究对于深入理解疾病机制、疾病诊断和治疗具有重要意义。

形成机制

8-OHdG 的生成主要是由于活性氧(ROS)对 DNA 的损伤。在正常生理条件下,细胞内的线粒体呼吸和代谢等过程会持续产生少量的 ROS,例如超氧阴离子、过氧化氢和羟基自由基等。这些活性氧在体内的氧化还原系统调控下,保持着动态平衡。然而,当细胞受到外部刺激,如紫外线照射、电离辐射、化学致癌物质或炎症反应,或者细胞内部的抗氧化防御机制失调时,ROS 的生成会显著增加。过量的 ROS 会对 DNA 分子造成攻击,其中G因其较低的氧化电位,最容易被 ROS 氧化修饰,从而形成 8-OHdG。8-OHdG 的生成改变了 DNA 的结构和理化特性,如果未能及时修复,可能导致 DNA 复制错误,引发基因突变,进而影响细胞的正常功能和生命活动。

检测方法

高效液相色谱 - 质谱联用(HPLC - MS)

HPLC - MS 是目前检测 8 - OHdG 的常用方法之一。该方法利用高效液相色谱的分离能力,将 8 - OHdG 从复杂的生物样品基质中分离出来,再结合质谱的高灵敏度和高特异性检测能力,对 8 - OHdG 进行准确定量分析。HPLC - MS 具有检测限低、准确性高、能够同时检测多种修饰产物等优点,可用于检测血清、尿液、细胞裂解液等各类生物样本中的 8 - OHdG 含量,但设备昂贵,操作复杂,对技术人员要求较高。

酶联免疫吸附测定法(ELISA)

ELISA 方法基于抗原 - 抗体特异性结合的原理,利用针对 8 - OHdG 的特异性抗体,通过免疫反应检测样品中的 8 - OHdG。该方法操作相对简便,不需要复杂的仪器设备,适合大规模样本的快速筛查,成本较低。但 ELISA 方法的特异性和灵敏度相对 HPLC - MS 略低,可能会受到样本中其他类似结构物质的干扰,导致检测结果出现偏差。

气相色谱 - 质谱法(GC - MS)

GC - MS 先将样品中的 8 - OHdG 进行衍生化处理,使其具有挥发性,然后通过气相色谱进行分离,最后利用质谱进行检测。该方法具有良好的分离效果和检测灵敏度,可用于检测痕量的 8 - OHdG,但衍生化过程较为繁琐,耗时较长,限制了其在临床快速检测中的应用。

生物学意义

8 - OHdG 是一种重要的生物标志物,用于指示 DNA 的氧化损伤,其在细胞内具有显著的生物学意义。它能够反映细胞内氧化应激的程度。当细胞内 8 - OHdG 的浓度升高时,意味着细胞可能正处于氧化应激状态,且抗氧化防御系统的功能可能出现问题。此外,8 - OHdG 的积累与细胞的衰老和凋亡过程有着密切的联系。过量的 8 - OHdG 会激活细胞内部的 DNA 损伤修复机制,但如果损伤过于严重而无法修复,细胞可能会启动凋亡程序,以防止因基因突变而导致的恶性转化。同时,8 - OHdG 还参与细胞内的信号传导过程,通过激活或抑制相关信号通路,调节细胞的生长、分化和代谢等生理活动。


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