小鼠胚胎成纤维细胞培养方法

上海劲马实验设备有限公司

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细胞英文名称   MEF  细胞中文名   小鼠胚胎成纤维细胞
形态特性       成纤维细胞样　  生长特性    贴壁生长
特征特性     取孕9天的615小鼠胚胎，去除脑、心脏等培养建立。该细胞可用作饲养层细胞，支持胚胎干细胞ES的生长并维持ES未分化的状态。当作为饲养层细胞时，MEF需经丝裂霉素C处理停止生长。建议作为ES细胞的饲养层时，MEF不要超过6代。
培养基   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium （DME H-21 4.5g/Liter Glucose）
血清   10%CS　  其它因子   无

传代方法
细胞*汇合时，倒掉旧液，加入消化液（0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA）2ml消化，显微镜下观察细胞*脱离瓶壁分离成单个细胞后弃掉胰酶，加培养基混匀分瓶，T25瓶中加培养基至6-8ml，T75瓶加培养基至20ml，37℃，5%CO2孵箱培养。   P1
冻存条件   基础培养基+5%DMSO+20%FBS　  支原体检测   阴性
同工酶   　  染色体
使用权限   A类  实物状态   可用