浅谈实验室细菌菌种的保存2

1 甘油液保存法

将已分纯的待存菌接种于肉汤中，37℃培养18～24h，然后按5份肉汤溶液、2份甘油－生理盐水保存液的比例分装于灭菌的微量离心管或细胞冻存管中，贴上标签，置－80℃～－20℃冰箱保存。此法操作简便，不需要特殊设备，效果好，可以保存菌种3年左右，无变异现象，而且此方法还可以保存一些要求较高的特殊菌种，适用范围广。所以此方法适合实验室普通菌种或特殊菌种的较长期的保存［4］。
2 湿牛奶冻存法
将待存菌种于各自生长良好的平板培养基上，经分纯后放入培养箱培养。用准备好的保护剂牛奶洗下菌苔，再用无菌毛细滴管吸取菌悬液滴入菌种管球部，每管球部约有一半的菌液，之后火焰封口，贴上标签，保存于－20℃冰箱。此方法操作比较简便，不需特殊设备、不需要花费很多时间，而且保存时间大约3年，时间较长，不易变性，也不容易污染。所以此方法适合实验室菌种较长时间的保存［3］。
3 蒸馏水保存法
取灭菌蒸馏水6～7ml加于已接待存菌斜面培养基的试管内，用吸管研磨，洗下斜面上的菌苔，充分混匀，将此菌液分装于灭菌的螺旋小瓶中，或用胶塞密封，贴上标签，置于4℃保存。此法制作简单，不需要特殊设备，且不需要经常移种，而且可以保存数年，但要注意保存的时候需要直立放置。所以此方法适合实验室菌种的长期保存［4］。
4冷冻真空干燥法
将待存菌分纯后，用准备好的保护剂牛奶洗下菌苔，把菌悬液滴入菌种管后，在管口抽取少许棉花塞入管内*处，放入冰箱－40℃速冻40min，放入准备好的混有盐的冰中，接上真空泵，真空抽干呈粉末状，火焰封口，贴上标签，保存于－40℃冰箱。此法保存时间长，可达15年，不易变性，但需要仪器，一般实验室难以配备，而且过程复杂，操作难度大，需要较长时间才能完成。所以此方法适合具有条件的实验室菌种的长期保存［3］。
6小结
综上所述，我们在做实验过程中或者短期保存菌种时，可以选择斜面低温保存法、半固体琼脂法、液体石蜡保存法、高层半固体琼脂石蜡保存法、纸片法，进行保存；如果需要较长时间的保存菌株，可以选择甘油液保存法、湿牛奶冻存法、蒸馏水保存法、冷冻真空干燥法保存菌株，其中冷冻真空干燥法需要实验室配备好相应的仪器设备。如果一些菌株营养要求比较高的话，可以选择甘油液保存法、冷冻真空干燥法保存。当然上述菌株保存的方法不是、zui方便的保存法，还需要我们不断的探索，不断的研究，找到一种或几种简单、方便、时间长的保存方法。