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牛牛天天人人综合影院 人半胱氨酸蛋白酶抑制剂3(CST3)ELISA试剂盒酶法
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- 【资料简介】
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人半胱氨酸蛋白酶抑制剂3(CST3)ELISA试剂盒酶法
规 格:96T/48T
检测标本:血清 , 血浆 , 尿液 , 胸腹水 , 脑脊液 , 细胞培养上清 , 组织匀浆等
检测方法:ELISA
检测类型:酶联免疫夹心法
产品的用途:仅供科研究课题使用
人半胱氨酸蛋白酶抑制剂3(CST3)ELISA试剂盒酶法 价格及详细资料 : 齐一生物: ;程 在线客服 ;; ; .齐一生物科技(上海)有限公司提供 的 ELISA 试剂盒受到了广大科研单位的一致肯定和认同 . *保证 , 价格公道 , 倾力为国内外科研院校实验室提供zui的产品 . 若有需要 , 我司将竭诚为您服务! 本试剂盒用于测定血清 , 血浆及相关液体样本中含量 .
实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中 该产品 水平 . 用纯化的 本产品 抗体包被微孔板 , 制成固相抗体 , 往包被单抗的微孔中依次加入 本产品 抗原 , 再与HRP标记的 本产品 抗体结合 , 形成抗体-抗原-酶标抗体复合物 , 经过*洗涤后加底物TMB显色 . TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色 , 并在酸的作用下转化成zui终的黄色 . 颜色的深浅和样品中的 本产品 呈正相关 . 用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值) , 通过标准曲线计算样品中 该产品 浓度 .
试剂盒组成:
试剂盒组成
48孔配置
96孔配置
保存
说明书
1份
1份
封板膜
2片(48)
2片(96)
密封袋
1个
1个
酶标包被板
1×48
1×96
2-8℃保存
标准品:180 0 ng/L
0.5ml×1瓶
0.5ml×1瓶
2-8℃保存
标准品稀释液
1.5ml×1瓶
1.5ml×1瓶
2-8℃保存
酶标试剂
3 ml×1瓶
6 ml×1瓶
2-8℃保存
样品稀释液
3 ml×1瓶
6 ml×1瓶
2-8℃保存
显色剂A液
3 ml×1瓶
6 ml×1瓶
2-8℃保存
显色剂B液
3 ml×1瓶
6 ml×1瓶
2-8℃保存
终止液
3ml×1瓶
6ml×1瓶
2-8℃保存
浓缩洗涤液
(20ml×20倍)×1瓶
(20ml×30倍)×1瓶
2-8℃保存
标本要求:
1.标本采集后尽早进行提取 , 提取按相关文献进行 , 提取后应尽快进行实验 . 若不能马上进行试验 , 可 将标本放于 -20℃保存 , 但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品 , 因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性 .
操作步骤:
- 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔 , 在*、第二孔中分别加标准品100μl , 然后在*、第二孔中加标准品稀释液50μl , 混匀;然后从*孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔 , 再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl , 混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉 , 再各取50μl分别加到第五、第六孔中 , 再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul , 混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中 , 再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl , 混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中 , 再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl , 混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉 . (稀释后各孔加样量都为50μl , 浓度分别为12 0 0 ng/L , 80 0 ng/L , 40 0 ng/L , 20 0 ng/L , 10 0 ng/L) .
- 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂 , 其余各步操作相同)、待测样品孔 . 在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl , 然后再加待测样品10μl(样品zui终稀释度为5倍) . 加样将样品加于酶标板孔底部 , 尽量不触及孔壁 , 轻轻晃动混匀 .
- 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟 .
- 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用 .
- 洗涤:小心揭掉封板膜 , 弃去液体 , 甩干 , 每孔加满洗涤液 , 静置30秒后弃去 , 如此重复5次 , 拍干 .
- 加酶:每孔加入酶标试剂50μl , 空白孔除外 .
- 温育:操作同3 .
- 洗涤:操作同5 .
- 显色:每孔先加入显色剂A50μl , 再加入显色剂B50μl , 轻轻震荡混匀 , 37℃避光显色15分钟.
- 终止:每孔加终止液50μl , 终止反应(此时蓝色立转黄色) .
- 测定:以空白空调零 , 450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值) . 测定应在加终止液后15分钟以内进行 .
注意事项:
- 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用 , 酶标包被板开封后如未用完 , 板条应装入密封袋中保存 .
- 浓洗涤液可能会有结晶析出 , 稀释时可在水浴中加温助溶 , 洗涤时不影响结果 .
- 各步加样均应使用加样器 , 并经常校对其准确性 , 以避免试验误差 . 一次加样时间控制在5分钟内 , 如标本数量多 , 使用排 抢 加样 .
- 请每次测定的同时做标准曲线 , 做复孔 . 如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值) , 请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定 , 计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×5) .
- 封板膜只限一次性使用 , 以避免交叉污染 .
- 底物请避光保存 .
- 严格按照说明书的操作进行 , 试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
- 所有样品 , 洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理 .
- 本试剂不同批号组分不得混用 .
10. 如与英文说明书有异 , 以英文说明书为准 .
人半胱氨酸蛋白酶抑制剂3(CST3)ELISA试剂盒酶法 计算:
以标准物的浓度为横坐标 , OD值为纵坐标 ,
在坐标纸上绘出标准曲线 , 根据样品的OD
值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释
倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标
准曲线的直线回归方程式 , 将样品的OD值
代入方程式 , 计算出样品浓度 , 再乘以稀释
倍数 , 即为样品的实际浓度 .
试剂盒性能:
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上 .
2.批内与批见应分别小于9%和11%
保存条件及有效期:
1.试剂盒保存;2-8℃ .
2.有效期:6个 月
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