蛋白激酶G(PKG),又称为cGMP依赖性蛋白激酶,是一种由cGMP激活的Serine/Threonine特异性蛋白激酶。
功能与特性
激活机制:PKG是第二信使分子cGMP的主要受体之一。当cGMP与PKG的调节结构域结合时,会引起构象变化,从而释放N末端结构域对催化核心的抑制,允许底物蛋白中的Serine/Threonine残基磷酸化。
生物活性:
平滑肌松弛:PKG在平滑肌组织中促进钙激活钾通道的开放,导致细胞超极化和松弛,并阻断磷脂酶C的激动剂活性,减少三磷酸肌醇释放储存的钙离子。
细胞增殖与凋亡:在许多(但不是全部)细胞类型中,激活的PKG会抑制细胞增殖和/或诱导细胞凋亡。
其他功能:PKG还参与血小板功能、精子代谢、细胞分裂和核酸合成的调节。
基因与表达:已在哺乳动物中鉴定出两种PKG基因,编码PKG I型(PKG-I)和II型(PKG-II)。PKG-I主要位于细胞质中,而PKG-II通过N末端肉豆蔻酰化锚定在质膜上。两者在不同的细胞类型中表达,具有不同的生物学作用。
结构特征
PKG的每个亚基由三个功能域组成:
N末端结构域:介导同二聚化、抑制激酶活性以及与其他蛋白质的相互作用。
调节域:包含两个不相同的cGMP结合位点,以高亲和力和低亲和力结合cGMP。
激酶结构域:催化磷酸盐从ATP转移至靶蛋白Serine/Threonine侧链羟基的反应。
酶联免疫吸附试验(ELISA)是一种基于抗原与抗体特异性反应的检测方法。它利用抗体能够特异性地结合抗原的特性,通过一系列的反应步骤,如抗体包被、抗原结合、酶标抗体反应和底物显色等,实现对目标抗原或抗体的定量检测。ELISA具有灵敏度高、特异性强、操作简便等优点,被广泛应用于生物医学研究和临床诊断中。